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     在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再 进行测定,证试剂盒温度要和室温一致。如果把试剂盒从冰箱拿出来直接做实验会造成一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因为在后面的孵育反应步骤中,造成孵育时间不够。其次,ELISA实验中洗板用的洗液需每日更换配制,稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。

     用于baiELISA测定的临床标本du最为常用zhi的是血清(浆)。本实验室用ELISA测定乙肝两对半,甲肝,戊肝,抗HIV的标本时,在处理和保存方面要考虑以下几个方面: 1) 要注意避免出现严重溶血及血清中混有红细胞。当标本出现严重溶血及血清中混有红细胞时,反应孔不易洗净,残留在反应孔内的血红蛋白具有过氧化物酶的活性,显色时可能造成假阳性。 2) 标本凝固不全强行离心,造成血清中含有少量的纤维蛋白原,在实验过程中形成纤维蛋白吸附在反应孔孔壁上不易洗掉,易造成假性结果。 3) 血清标本可在2~8℃下保存1周。如血清样本需长时间保存,则需放入-20℃冰柜内冰冻保存。冰冻保存的血清标本须注意避免反复冻融,标本可能引起假阴性结果。此外冻融标本的混匀不要进行剧烈振荡,应反复颠倒混匀。


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脂质体转染法常用步骤

1. 转染试剂的准备


① 将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。


② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。


2. 选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体 体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡后在加入合适体积的转染试剂,再次震荡。


3. 将混合液在室温放置10―15分钟。


4. 吸去培养板中的培养基,用PBS或者无血清培养基清洗一次。


5. 加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。


6. 到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入完全培养基继续培养24-48小时。


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MYO/MB elisa酶联免疫试剂盒双抗体夹心法

1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。

4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。


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做为viagen的一级代理商,竭诚为您服务!

viagen品牌简介:上海莼试生物技术有限公司客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。公司的服务和业务 在同行获得一致好评。其立足于生命科学领域,全力打造高品质生物科技产品链和技术服务链,也具备丰富的管理经验,同时我们建立了集技术支持、售后服务等多方位的服务体系。我们有激情、有理想,更有责任感,是您科研道路上值得信赖的伙伴。

公司的理念是:以诚信为本,努力打造优质品牌,为您提供全方位的售中、售后服务。

viagen实验方法1:1.1 药敏片的制备:一般情况下,可以从厂家获取。如无法获取,可以自行制备。首先,新华号定性滤纸,用内径为6mm的打孔器制备好纸片,按每包100片包装好,高压灭菌,烘干备用。然后,将待检药物用蒸馏水按实际用量的10倍稀释,充分溶解后,取1mL加到100片灭菌好的纸片上,放入4℃冰箱,待其充分吸收后(一般要4-8小时),平铺于平皿上,在37℃温箱中充分烘干(2-810小时),干燥后立即封装于灭菌的小瓶内,密闭保存。

viagen品牌涉及领域:【生物分子】 抗生素/抗真菌素 维生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖类 白三烯 前列腺素 药物结合物 抗氧化剂 药理活性化合物 类固醇激素结合物 半抗原反应 半抗原载体结合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 亲和素/链霉亲和素

【蛋白质/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封闭肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 细菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 细胞质蛋白 总蛋白 膜蛋白 核蛋白 细胞裂解和提取物 线粒体蛋白 细胞裂解 组织提取 重组细胞因子 其它

【常用生化试剂】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物学缓冲液 蛋白生化缓冲液 去垢剂 染色试剂 溶剂 酸碱 化学试剂 其它生化试剂

【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR试剂 PCR对照 特异性PCR试剂盒 PCR克隆试剂盒 RNA 载体及构建 PCR克隆载体 M13克隆载体 细菌克隆载体 文库及构建 cDNA文库 基因组文库 噬菌体展示文库

【酶】限制性内切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 连接酶

【cDNA及合成纯化】cDNA全长基因 RNA cDNA合成 cDNA相关试剂

【核酸/蛋白合成】Oligo纯化 核酸合成柱 核酸合成试剂

【克隆与表达】克隆基因 克隆试剂盒 克隆筛选

【表达分析】 Northern印迹分析 分支DNA和mRNA定量

【蛋白分析】 PAGE凝胶制备 蛋白电泳试剂 预制蛋白凝胶

【核酸纯化】 DNA凝胶纯化 DNA提取纯化 PCR产物纯化

【RNAi技术】 siRNA 反义寡核苷酸 RNAi定量 RNAi文库

【蛋白检测】 Western印迹 报告基因检测 蛋白检测试剂盒

【实验动物】 转基因动物 小鼠 大鼠 模式动物

【临床检测试剂】 生化检测 遗传学检测 血液检测

【相关检验试剂】 食品安全检测 药品安全检测

【蛋白纯化】 蛋白提取 蛋白透析 蛋白定量 蛋白稳定

【细胞培养】 血清 血清替代物 细胞培养基 细胞 细胞株 感受态细胞 新鲜细胞分离

【干细胞】 干细胞/祖细胞 原代细胞 干细胞培养基

【蛋白修饰】 蛋白标记 载体蛋白结合 其它

【细胞生物学检测】 细胞凋亡 细胞分离 细胞增殖

【药物筛选】 荧光素细胞活力/增殖/毒性检测

【免疫检测】 放射性免疫检测 化学发光免疫检测

viagen授权代理使用方法2:1.2 培养基的制备:用托盘天平称取营养琼脂4克,加入洁净的容器内,再用量筒加入200mL蒸馏水,121℃,灭菌20分钟。灭菌后,冷却至50-60℃,在超净台内,迅速将培养基倒入灭菌的培养皿内,每个平皿15mL左右,轻摇平皿,使培养基分布均匀。待其冷却凝固后,即可使用,或放入810℃冰箱备用。


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人缺氧诱导因子1αelisa检测试剂盒双抗体夹心法

1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。

2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。

4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。


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中国的传统佳节端午节即将来,根据国家法定节假日安排及我公司之实际情况,经公司领导研究决定我公司2020年端午节放假具体安排如下:


2020年端午节放假时间从2020年6月25日-2020年6月27日,共3天


其中2020年6月25日(星期四)为端午节当天,国家规定假日放假一天


2020年6月26日(星期五)放假一天,与2020年6月28日(星期日)对调,2020年6月28日正常上班。


温馨提示:出门注意安全,值此关键时期,节日期间减少外出,外出戴好kou罩、做好防护、勤洗手、多通风、避免聚集、文明、平安度过节日假期


ELISA试剂盒


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寻常圆线虫PCR检测试剂盒检测方法:

1.Ⅰ法:

在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。

定量PCR扩增荧光曲线图

PCR产物熔解曲线图

2.TaqMan探针法:

探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。

取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。

③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积yibing醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%yi醇(75%yi醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分yi醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。


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榧子染料法PCR鉴定试剂盒反应的特异性決定因素:

1.引物与模板DNA特异正确的结合。

2.碱基配对原则。

3. Tag DNA聚合酶合成反应的忠实性。

4.靶基因的特异性与保守性。

其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及 Tag DNA聚合醇耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大増加加,被扩増的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。

灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式増加的,能将皮克(pg=10-129)量级的起始待測模板扩増到微克(ug=10-69)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zu小检出率为3个细菌。

(3)简便、快速

PCR反应用耐高温的 Tag DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩増液和水浴锅上进行变性退火-延伸反应,一般在2-4小时完成扩増反应。扩増产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。

(4)对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA粗制品及总RNA均可作为扩増模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。


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一年一度的618狂欢盛典来啦!


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凡购买ELISA试剂盒金额满8000元,即可获赠马克杯一个;

名额有限,请速速购买。


活动时间:2020.6.16-2020.6.25


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活动时间:2020.6.16-2020.6.25


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      由真核细胞构成的生物称为真核生物。在真核细胞的核中,DNA与组蛋白等蛋白质共同组成染色体结构,在核内可看到核仁。在细胞质内膜系统很发达,存在着内质网、高尔基体、线粒体和溶酶体等细胞器,分别行使特异的功能。

           

     真核生物包括我们熟悉的动植物以及微小的原生动物、单细胞海藻、真菌、苔藓等。真核细胞具有一个或多个由双膜包裹的细胞核,遗传物质包含于核中,并以染色体的形式存在。染色体由少量的组蛋白及某些富含精氨酸和赖氨酸的碱性蛋白质构成。真核生物进行有性繁殖,并进行有丝分裂。也有些真核生物的细胞也能进行无丝分裂,如蛙的红细胞,人的肝脏细胞。

    真核细胞出现了特化的内膜系统,这样虽然真核细胞相对于原核细胞体积增大了,但相应的膜表面积液大大增加。真核细胞中的内膜系统可使细胞内部结构区室化,比如形成细胞器如线粒体,内质网等,从而形成相对独立的空间,在这个空间里的物质浓度可以与外面不同,因此一些重要分子的浓度并没有被稀释。

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牛的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒注意事项:


1.  试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。


2.  浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。


3.  各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。


4.  请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。


5.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。


6.  底物请避光保存。


7.  严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.


8.  所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。


9.  本试剂不同批号组分不得混用。


10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

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草鱼鱼鳔上皮样细胞培养步骤:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1)准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,货号16000-044),15%。

2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

二.细胞处理:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。


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猴性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒操作步骤:


1,试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。


2,实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。


3,不用的其它试剂应包装好或盖好。


4,使用一次性的吸头以免交叉污染,避免使用带金属部分的加样器。


5,使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。


6,洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。


7,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。


8,严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为主。


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小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒操作步骤:


1,试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。


2,实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。


3,不用的其它试剂应包装好或盖好。


4,使用一次性的吸头以免交叉污染,避免使用带金属部分的加样器。


5,使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。


6,洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。


7,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。


8,严格按照说明书的操作方法进行操作。说明书以英文说明书为主。


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618大促活动钜惠来袭,全年最低!仅此一次!错过一次等上一年抓住机会

活动主题

活动:

Snail蛋白抗体新品上架下单立减50元

活动二:除新品产品外,全场第二件产品5折

动三:除新品产品外,全场满5000送惊喜大礼包!

活动时间:2020.6.1-2020.6.20

活动细则

1本次活动仅限终端科研用户,elisa试剂盒部分产品也参与此次活动中

2.以上活动承受单位预存款,有需要的客户赶忙联x我司出售人员哦。

3.本次活动zui终解释权归我公司一切.

●本公司产品已经过严格的质量检测,让您的实验无后顾之忧!


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