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刚果锥虫探针法荧光定量PCR试剂盒检测样品RNA的抽提

 

刚果锥虫探针法荧光定量PCR试剂盒检测样品RNA的抽提:

①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。

②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚氯仿相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。

③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。

 育亨宾 英文名称: Yohimbine CAS号: 146-48-5 分子式: 354.45 分子量: C21H26N2O3
 罗通定 英文名称: Luo Tongding CAS号: 10097-84-4 分子式: 355.427 分子量: C21H25NO4
 七叶皂苷钠 英文名称: Seven leaves saponins sodium CAS号: 20977-05-3 分子式: 分子量:
 人参皂苷Rg3 英文名称: Ginsenoside Rg3 CAS号: 38243-03-7 分子式: 785.02 分子量: C42H72O13
 人参皂苷Rf11 英文名称: Ginsenoside Rf11 CAS号: sdfsg 分子式: 分子量:
 匹莫林 英文名称: Pi Molin CAS号: 2152-34-3 分子式: 176.17 分子量: C9H8N2O2
 多巴胺盐酸盐 英文名称: Dopamine hydrochloride CAS号: 62-31-7 分子式: 189.64 分子量: C8H12ClNO2
 盐酸多塞平 英文名称: Doxepin hydrochloride CAS号: 1229-29-4 分子式: 315.84 分子量: C19H22ClNO
 盐酸多沙普仑 英文名称: Do Schaap Leon hydrochloride CAS号: 7081-53-0 分子式: 414.97 分子量: C24H31ClN2O2
 盐酸苯海索 英文名称: Trihexyphenidyl hydrochloride CAS号: 52-49-3 分子式: 224.6 分子量: C7H9ClO6
 盐酸苯海拉明 英文名称: Diphenhydramine hydrochloride CAS号: 147-24-0 分子式: 291.82 分子量: C17H22ClNO
 氢溴酸加兰他敏 英文名称: Galanthamine hydrobromide CAS号: 1953/4/4 分子式: 368.27 分子量: C17H22BrNO3
 马来酸氯苯那敏 英文名称: Maleic acid - - - - - - - - - - CAS号: 113-92-8 分子式: 390.86 分子量: C20H23ClN2O4