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脂质体转染法常用步骤

 

脂质体转染法常用步骤

1. 转染试剂的准备


① 将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。


② 震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。


2. 选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体 体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡后在加入合适体积的转染试剂,再次震荡。


3. 将混合液在室温放置10―15分钟。


4. 吸去培养板中的培养基,用PBS或者无血清培养基清洗一次。


5. 加入混合液,将细胞放回培养箱中培养一个小时。


6. 到时后,根据细胞种类决定是否移除混合液,之后加入完全培养基继续培养24-48小时。