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     细胞的激活,扩增以及效应功能是免疫细胞生命周期的关键方面。研究人员正利用XF技术来检测免疫细胞与其代谢特征之间的联系,从而深入了解疾病的病理,病因,以及可能的治疗方案。XF细胞线粒体压力测试检测线粒体功能的关键参数:呼吸水平基础值、ATP合成相关的呼吸值、质子渗漏水平、呼吸能力最大值和呼吸能力储备值。XF糖酵解压力测试则检测糖酵解功能的三个关键参数:糖酵解水平、糖酵解能力最大值和糖酵解能力储备值。

代谢重编程

     细胞信号通过协调免疫细胞通讯和活动,在诱发免疫应答中起着重要的作用。研究人员正利用XF技术探讨免疫细胞中的信号和代谢编程。

代谢在生物治疗中的作用

    免疫系统的主要作用是通过靶向外来抗原,控制或清除感染,以及攻击癌细胞来保护宿主。然而,代谢干预是疾病研究中很大程度上未被开发的领域。XF技术为了解潜在治疗方案对目标抗原和免疫系统的影响提供了必要的工具。


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     一项新的研究揭示了一种先前未知的机制,即控制感染细菌的病毒是否会迅速杀死宿主或保持潜伏在细胞内。研究人员表示,eLife杂志报道的这一发现也可能适用于感染人类和其他动物的病毒。


“我第一次发现DNA如何被包装在病毒体内的机制决定了感染过程,”伊利诺伊大学病理学家教授Alex Evilevitch说。


     在将DNA注入细胞后,病毒倾向于遵循两种主要途径之一,称为“裂解”或“潜伏”感染。在裂解途径中,病毒DNA迅速占据宿主细胞自身的资源,自己制造数百份拷贝。然后新病毒杀死细胞并继续在其他细胞中重复循环。


     然而,潜伏的病毒感染遵循不同的过程:一旦进入细胞内,病毒DNA就会进入宿主基因组。当细胞分裂时,病毒DNA也会复制。只要感染仍然潜伏,在宿主中几乎没有证据。


     Evilevitch表示,潜伏性病毒感染的问题在于,在宿主的压力下,病毒会突然转变为裂解性,接管细胞并在疯狂的繁殖后杀死它。


“我们携带的许多病毒感染可能会在很长一段时间内潜伏。有时它们会溶解,当我们出现症状时,”他说。


人类潜伏性病毒感染包括单纯疱疹,水痘带状疱疹,Epstein-Barr,人巨细胞病毒,腺病毒,卡波西肉瘤等。


“了解调节从潜伏状态到裂解状态的转换非常重要,这样我们就可以阻止这些感染蔓延,”Evilevitch说。


    许多关于病毒感染动态的研究都集中在保护病毒遗传物质并将其穿梭到感染部位的蛋白质衣壳的结构特征上。 Evilevitch在将病毒DNA分子注射到宿主体内之前,反而研究了它们的压力和应变。


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需要培养大量的细胞,忙得焦头烂额,又担心污染?别急,现在有了新工具来帮忙。Falcon?多层细胞培养瓶能够帮助您更快、更方便地培养细胞,从而使细胞培养工作更为有效。


TC 处理的 Falcon? 多层细胞培养瓶有3层和5层两种规格可选,分别提供525cm2和875cm2的细胞生长表面积,可承载培养基的体积范围大 (最高达50 ml/层)。

适用于多种细胞系


多种细胞系和原代培养物 (有或无血清) 能够在Falcon? 多层细胞培养瓶中生长和有效的收获。同时,它也是多能干细胞培养的理想选择。


特点

? 培养基在各层均匀分布,保障细胞生长均匀

? 可在培养瓶中直接混合细胞和试剂,节省时间并减少污染发生的风险

? 灵活的设计可采用倾倒或者移液管转移液体或收获细胞

? 表面处理的一致性保障细胞培养规模升级

? 每一个培养瓶上印有批号便于追溯

? 生产过程符合cGMP规范


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      中枢神经系统的组织由两类细胞组成,它们可以广义地分为神经元和神经胶质。神经元是大脑的解剖、功能及营养上的单元。尽管神经元在大小和形状上有很大的差异,但它们都具有共同的形态学特征,而且它们是复杂的通信网络中的重要物质。神经元是动态极化的细胞,并且是神经系统中的主要信号物质。人类大脑包含1x10^11神经元,而且每个神经元至少可与10000个其它神经元互通信息。


      神经元即神经细胞,是神经系统最基本的结构和功能单位。分为细胞体和突起两部分。细胞体由细胞核、细胞膜、细胞质组成,具有联络和整合输入信息并传出信息的作用。突起有树突和轴突两种。树突短而分枝多,直接由细胞体扩张突出,形成树枝状,其作用是接受其他神经元轴突传来的冲动并传给细胞体。轴突长而分枝少,为粗细均匀的细长突起,常起于轴丘,其作用是接受外来刺激,再由细胞体传出。轴突除分出侧枝外,其末端形成树枝样的神经末梢。末梢分布于某些组织器官内,形成各种神经末梢装置。感觉神经末梢形成各种感受器;运动神经末梢分布于骨骼肌肉,形成运动终极。


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     最近,瑞士联邦理工学院的Bernd Wollscheid和西雅图系统生物学研究院的Julian Watts开发出一种新策略,来描绘细胞表面的蛋白质组。过去在分析细胞表面蛋白时,常常遇到的困难就是分离膜蛋白组分,以及用质谱来分析疏水跨膜蛋白。但Wollscheid的小组灵机一动,绕过了这块大石头。由于细胞表面的大部分蛋白都被糖基化,如果能选择性捕获糖基化肽段,那问题可能会简单很多。



     他们开发的细胞表面捕获策略是从完整的活细胞上分离表面N-连接的糖肽,首先利用温和的氧化步骤把所有多糖的cis-diol基团转化成醛,并用肼化生物胞素(biocytin hydrazide)标记。标记的肽段被消化,并亲和纯化。之后利用酶将多糖从天冬酰胺残基上切下,从而从磁珠上释放。在切割的过程中,天冬酰胺转变成天冬氨酸。这种质量的转移有两个目的:它能被质谱仪所检测,进而定位糖基化位点,以及之前来自细胞表面的糖基化肽段。



     Wollscheid的小组已经利用这个策略绘制了几个不同细胞系以及原代细胞的表面蛋白质组图谱。他们还将细胞表面捕获与定量蛋白质组结合起来。他们跟踪了小鼠胚胎干细胞在分化成神经前体细胞时表面蛋白质组是如何变化的。Wollscheid说:“我们面临的问题是,细胞表面的蛋白究竟是发生了改变,还是蛋白没变,而只是数量有变?我们现在已经找到了解决办法。”他们正在开发绝对定量方法,应该能大大增加此方法的灵敏度。


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     为阐明肠道微生物昼夜性节律变化,作者对小鼠进行了研究。让小鼠暴露于黑暗中12个小时,然后暴露在光线中12个小时,循环多次。结果发现在结肠细菌生物地理学方面出现实质性变化,特别是在光照期间上皮粘液层中的细菌数量减少,并且在黑暗期间具有最高的数量。一些物种(如典型的粘液性细菌Mucispirillumschaedleri)在上皮粘附方面出现较大的变化。


      此外,宏基因组测序显示那些涉及到趋化性、鞭毛运动和粘液降解的代谢途径也具有昼夜振荡的特点。细菌生物地理学中的这些变化受到进食模式和上皮屏障功能的影响,但不受宿主的分子时钟的影响。


     为了评估微生物群振荡对宿主的影响,作者研究了宿主转录组和表观基因组的节律性。使用抗生素和无菌处理的小鼠在宿主肠道中的转录组和表观基因组的分布发生显著变化。出乎意料的是,在微生物耗尽之后,参与代谢平衡的基因和通路重新获得节律性,因此作者提出以下假设:宿主重新获得振荡功能以弥补肠道微生物组的缺失。可以通过克隆无菌小鼠进行验证。小鼠含有来自小鼠和大鼠的段丝状细菌体建群来证实。其中,前者表现出鼠肠上皮的粘附性获得强化。只有表现出节律性上皮组织粘附的细菌才能够影响转录宿主振荡的编程。

     总之,这项研究可以让我们深入地了解到肠道微生物组在昼夜生理学以及外周器官转录活性调节中的作用,可以为治疗与昼夜节律时钟功能障碍相关的人类疾病提供新的思路。

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    采用已建立的间接 ELISA 法分别测定 3F7 和 9C4 各吸收峰的纯化产物,并与纯化前的腹水、50%饱 和(NH4)2SO4 沉淀和 45%饱 和 (NH4)2SO4 沉淀的蛋白效价进行比较。将纯化后腹水中 McAb 进行亲和常数的测定。


      免疫用抗原制备:参考文献的方法培养 A. acidoterrestris (ATCC49025),重复洗涤 2 次后,用生理盐水将该菌的浓度调整到 109 CFU/mL。


     包被用抗原制备:取部分洗脱好的菌液用超声波粉碎仪进行裂解。以 20 kHz 频率、150 W 的功率在冰浴中将细菌细胞破碎,每 6 s 间隔 4 s,总共时间为 30 min。裂解后将液体 3 000 r/min 离心 10 min,将上清与沉淀分别用 Eppendorf 管进行分装,存于?20 °C。


       筛选方法采用间接 ELISA,用方阵滴度法确定抗原包被浓度和酶稀释度。抗原分别做 1:1 000、 1:2 000、1:4 000 的稀释;酶标分别做 1:20 000、 1:40 000 的稀释;免疫小鼠多抗血清用样品稀释液从 40×起倍比稀释;HRP 标记的羊抗小鼠 IgG,用酶稀释液分别做 1:20 000、1:40 000 稀释;设阴性和空白对照;以 450 nm 波长,以空白对照调零,读记各孔光密度值(OD),凡P/N>2为阳性结果(P/N= 待测孔 OD 值/阴性对照孔 OD 值)。


      取 5 只 6?8 周龄体重 18 g 左右雌性的健康 BALB/c 小鼠,免疫前 7 天卡介苗致敏小鼠 (0.1 mL/每只)。每次免疫间隔 3 周,都较前一次免疫剂量加倍,共 3 次。于第 3 次免疫 7 d 后以间接ELISA 法检测小鼠抗体效价,取效价最高的小鼠脾脏进行细胞融合。确定的抗原包被浓度包被酶标板,将免疫小鼠全血按照 100×、200×、 400×?51 200×稀释,即倍比稀释的方法进行间接 ELISA 法检测。

      用 ELISA 叠加试验进行抗原位点分析(腹水和细胞上清),在确定各 McAb 饱和值的基础上,在最适菌体抗原包被的酶标板内分别加入一种饱和浓度 McAb1 (100 μL/孔),37 °C 作用 30 min,洗涤 4 次后加入另一种饱和浓度的 McAb2 (100 μL/孔),同样孵育洗涤;加入 1:1 000 稀释的羊抗小鼠 IgG-HRP (50 μL/孔),同样孵育洗涤;加入 TMB 底物溶液(100 μL/孔)显色 10 min,2 mol/L H2SO4 终止反应,测定 OD450 值,计算叠加率(AI)。按如下公式计算:AI=[2×A(1+2)÷(A1+A2)?1]×100%。公式中: A1为 McAb1 的 OD450值;A2为 McAb2 的 OD450值; A(1+2)为 McAb1 叠加 McAb2 的 OD450值。AI >50% 说明被测的两株单抗的抗原结合位点不同;AI<50% 说明被测的两株单抗抗原结合位点相同;且 AI 值越大,抗原位点重叠的可能性越小。

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      抗体是一种应答抗原产生的、可与抗原特异性结合的蛋白质。相信多数朋友肢体留在表面的理解,今天我们就跟随抗体定制一起去看看抗体的规律有哪些吧?

1、初次反应产生抗体:当抗原第一次进入机体时,需经一定的潜伏期才能产生抗体,且抗体产生的量也不多,在体内维持的时间也较短。


2、再次反应产生抗体:当相同抗原第二次进入机体后,开始时,由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合,可使原有抗体量略为降低。随后,抗体效价迅速大量增加,可比初次反应产生的多几倍到几十倍,在体内留存的时间亦较长。


3、回忆反应产生抗体:由抗原刺激机体产生的抗体,经过一定时间后可逐渐消失。此时若再次接触抗原,可使已消失的抗体快速上升。如再次刺激机体的抗原与初次相同,则称为特异性回忆反应;若与初次反应不同,则称为非特异性回忆反应。非特异性回忆反应引起的抗体的上升是暂时性的,短时间内即很快下降。


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       选择、购买和验收标准物质时应考虑哪些要素?您有疑问吗?本章应各界要求,对标准物质的选择购买条件作出解析,一起来看看我们为用户提供哪些选择要素吧:

用户在选择、购买标准物质时,应考虑以下要素:

(1)特性量的种类及定值方法:某些标准物质可能只适用某一特定方法或专属领域的应用,某些标准物质的值有特殊规定,如含结晶水的值,应对证书中该类说明加以注意,防止误选误用。

(2)特性量水平:标准物质的特性量水平应与日常测量样品的水平匹配。

(3)可接受的不确定度水平:标准物质特性量的相关不确定度水平应与日常测量中的精密度和正确度限度要求匹配。

(4)基体及可能的干扰:标准物质用于开展方法确认、质量控制以及一些基体效应较为严重的测量方法的校准时,基体应与日常测量样品基体尽可能接近。

(5)形式:标准物质可制备成不同的形式,如冻干与冰冻样品,制备方式的不同可能会导致相同特性在标准物质与真实样品中的行为差异,从而产生互换性问题,选购前应充分调研。

(6)zui小取样量:只要标准物质证书中规定了zui小取样量,用于测量的取样量应不小于该zui小取样量,因此选购时应考虑zui小取样量是否能满足测量方法要求。

(7)用量:标准物质的购买用量应足以满足整个实验计划中的应用,包括根据需要考虑的备样。

(8)稳定性:选购前应确认所购买批次标准物质的有效期限,避免使用时发生过期的情况。


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     研究人员发现,可以加强医学界为抗击这一迫在眉睫的超级细菌疫情所作的工作。通过测定抗病毒毒素的细菌DNA序列,研究人员发现了能够阻止危险的耐抗生素细菌生长的新蛋白。


    研究人员指出:“因为细菌和噬菌体已经共同进化了数十亿年,我们怀疑病毒可能精确地包含抗击细菌所必需的武器。所以我们在超过两年半的时间里,在细菌病毒中系统地筛选了这种蛋白。"研究人员利用高通量的DNA测序,找到了可抵御细菌病毒所产生的生长抑制因子毒性的细菌基因突变。通过这种方式,研究小组发现了一种新的小蛋白——生长抑制因子基因产物(Gp)0.6,它能特异地靶定和抑制细菌细胞所必需的一种蛋白的活性。该抑制因子被认为能削弱对细菌细胞极其重要的一种蛋白质——维持细菌细胞结构的一种蛋白。因此,这种细菌蛋白发生故障,就会导致细菌细胞的破裂和随后死亡。


       研究人员说:“新的技术和我们新的跨学科合作,借助于生物信息学和分子生物学研究,使我们的研究结果超出了预料。我们希望。我们的方法将被用来在细菌物种和高等生物中,进一步确定新的生长抑制因子及其靶标。"研究人员正在继续这项细菌病毒研究,希望利用还未得以描述的细菌病毒的蛋白质,来发现有助于改善抗药性细菌治疗的化合物和过程。他们认为,细菌病毒生物学的更多生物学知识,zui终将为抗击耐抗生素细菌带来意外的突破。


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     克隆化一般是指将抗体阳性孔进行克隆化。犚r为经过HAT筛选后的杂交瘤克隆不能保证一个孔内只有一个克隆。在实际工作中,可能会有数个甚至更多的克隆,可能包括抗体分泌细胞、抗体非分泌细胞;所需要的抗体特异性抗体分泌细胞和其它无关抗体分泌细胞。要想将这些细胞彼此分开,就需要克隆化。克隆化的原则是,对于检测抗体阳性的杂交克隆应尽早进行克隆化,否则抗体分泌的细胞会被抗体非分泌的细胞所抑制,因为抗体非分泌细胞的生长速度比抗体分泌的细胞生长速度快,二者竞争的结果会使抗体分泌的细胞丢失。即使克隆化过的杂交瘤细胞也需要定期的再克隆,以防止杂交瘤细胞的突变或染色体丢失,从而丧失产生抗体的能力。

  一 克隆化方案

  用克隆化的方法很多,而最常用就是有限稀释和软琼脂平板法。

  1. 有限稀释法的程序

  ① 制备饲养细胞悬液同融合前准备

  ② 阳性孔细胞的计数,并调细胞数在1~5×103/ml

  ③ 取130个细胞放入6.5ml含饲养细胞完全培养液,即20个细胞/ml,100μl/孔加A、B、C三排为每孔2个细胞。余下2.9ml细胞悬液补加2.9ml含饲养细胞的完全培养液,细胞数为10个/ml,100μl/孔加D、E、F三排,为每孔1个细胞。余下2.2ml细胞悬液补加2.2ml含饲养细胞的完全培养液,细胞数5个/ml,100μl/孔,加G、H两排,为每孔0.5个细胞。

  ④ 培养4~5天后,在倒置显微镜上可见到小的细胞克隆,补加完全培养液200μl/孔。

  ⑤ 第8~9天时,肉眼可见细胞克隆,及时进行抗体检测。

  注:初次克隆化的杂交瘤细胞需要在完全培养液中加HT。

  2. 软琼脂法

  ① 软琼脂的配制

  含20%FCS小牛血清的2倍浓缩的RPMI1640

  1%琼脂水溶液:高压灭菌,42℃预热。

  0.5%琼脂:由1份1%琼脂加1份含20%小牛血清的2倍浓缩的RPMI1640配制而成。置42℃保温。

  ② 用上述0.5%琼脂液含有饲养细胞15ml倾注于直径为9cm的平皿中,在室温中待凝固后作为基底层备用。

  ③ 按100/ml,500/ml或5000/ml等浓度配制需克隆的细胞悬液。

  ④ 1ml 0.5%琼脂液42℃预热在室温中分别与1ml不同浓度的细胞悬液相混合。

  ⑤ 混匀后立即倾注于琼脂基底层上,在室温中10分钟,使其凝固,孵育于37℃,5%CO2孵箱中。

  ⑥ 4~5天后即可见针尖大小白色克隆,7~10天后,直接移种至含饲养细胞的24孔板中进行培养。

  ⑦ 检测抗体,扩大培养,必要时再克隆化。

 

  二 杂交瘤细胞的冻存

  及时冻存原始孔的杂交瘤细胞、每次克隆化得到的亚克隆细胞是十分重要的。因为在没有建立一个稳定分泌抗体的细胞系的时候,细胞的培养过程中随时可能发生细胞的污染、分泌抗体能力的丧失等等。如果没有原始细胞的冻存,则因为上述的意外而全功尽弃。

  杂交瘤细胞的冻存方法同其他细胞系的冻存方法一样,原则上细胞应在每支安瓿含1×106以上,但对原始孔的杂交瘤细胞可以因培养环境不同而改变,在24孔培养板中培养,当长满孔底时,一孔就可以冻一支安瓿。

  细胞冻存液:

  50%小牛血清

  40%不完全培养液

  10% DMSO二甲亚砜

  冻存液最好预冷,操作动作轻柔、迅速。冻存时从室温可立即降到0℃,再降温时一般按每分钟降温2~3℃,待降至-70℃可放入液氮中。或细胞管降至0℃ 后放-70℃超低温冰箱,次日转入液氮中。也可以用细胞冻存装置进行冻存。冻存细胞要定期复苏,检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性,在液氮中细胞可保存数年或更长时间。

  五、单克隆抗体的大量生产

  大量生产单克隆抗体的方法主要有两种:

  1. 体外使用旋转培养管大量培养杂交瘤细胞,从上清中获取单克隆抗体。但此方法产量低,一般培养液含量为10~60μg/ml,如果大量生产,费用较高。

  2. 体内接种杂交瘤细胞,制备腹水或血清。

  ① 实体瘤法 对数生长期的杂交瘤细胞按1~3×107/ml接种于小鼠背部皮下,每处注射0.2 ml, 共2~4点。待肿瘤达到一定大小后一般10~20天则可采血,从血清中获得单克隆抗体含量可达到1-10mg/ml。但采血量有限。

  ② 腹水的制备 常规是先腹腔注射0.5mlPristane降植烷或液体石腊于BaLb/c鼠,1~2周后腹腔注射1×106个杂交瘤细胞,接种细胞7~10天后可产生腹水,密切观察动物的健康状况与腹水征象,待腹水尽可能多,而小鼠频于死亡之前,处死小鼠,用滴管将腹水吸入试管中,一般一只小鼠可获1~10ml腹水。也可用注射器抽取腹水,可反复收集数次。腹水中单克隆抗体含量可达5-20mg/ml, 这是目前最常用的方法,还可将腹水中细胞冻存起来,复苏后转种小鼠腹腔则产生腹水快、量多。


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     胚胎干细胞(ESC)具有非常高的异质性,在胚胎干细胞群体中不同的子群具有不同的细胞状态,并在基因表达、转录因子调控及表观遗传修饰方面均表现出广泛的差异。异质的 DNA 甲基化在平衡 ESCs 自我更新和多分化潜能之间具有重要作用,因此细胞间 DNA 甲基化异质性的研究对于理解胚胎干细胞生物学问题十分重要。近年来,单细胞测序技术已经成为研究复杂组织中细胞间甲基化异质性的有力工具,但怎样分析并解释单细胞间的甲基化变异仍具有很大挑战。


     中国科学院北京基因组所吕雪梅研究组与美国弗吉尼亚理工大学谢荷煌研究团队合作,利用小鼠胚胎干细胞得到的单细胞 DNA 甲基化测序数据,开发了一套生物信息分析流程,挖掘 ESCs 中的细胞子群特异 DNA 甲基化(CSM)。


     由于当前单细胞甲基化组数据具有覆盖细胞数少、测序乘数低以及 DNA 片段扩增偏好等缺陷,导致对等位基因特异甲基化(ASM)、非对称性甲基化(AM)在内的细胞内 DNA 甲基化异质性,和真正的 CSM 之间的区分能力十分受限。因此科研人员在过滤掉这些细胞内甲基化变异的干扰后,开发了新的统计模型,即“混合贝塔模型”以鉴定出真正的 CSM 位点。


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     来自英国索尔福德大学的医学微生物学家ChloeJames(未参与该项研究)点评道,“这是一个非常好的成果,充分展示了炎症对肠道噬菌体活性的影响。”“这第一次显示对于病原体-噬菌体转移进化来说,感染期间病原体本身活性开启具有十分重要的意义。”


     感染细菌性病原体的噬菌体病毒可能还会充当细菌毒力或抗菌素耐药基因的载体,从而令细菌性疾病加剧。为了研究这种现象,研究人员采用了一株感染了噬菌体SopEΦ的沙门氏菌来感染小鼠。由于沙门氏菌感染所致的炎症也令病原体本身承受压力,而其造成的损害促使了病毒复制,进而导致细菌胞壁破裂,菌体内的噬菌体被释放出来。这些噬菌体接着会感染其它沙门氏菌细胞,并可能同时传播新的致病毒力或抗药基因。


    研究人员指出,给活体小鼠接种一种可减轻炎症的疫苗会令由SopEΦ介导的基因转移减少,并保护小鼠免于细菌感染达3天。他们认为,以炎症作为治疗感染的标靶提供了一种优于抗菌素的治疗方法,因为前者能阻碍基因转移和病原体演化,而后者则会促使细菌演化,并最终令其产生针对抗菌素的抵抗力。


      这项研究表明,接种疫苗不仅可以防止细菌性疾病,而且可以降低细菌在体内转移遗传物质的能力,后者会增强病毒毒力或对治疗的抗性。


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     这项研究指出了将这些折叠错误zui小化的方法。虽然将成人干细胞转化回iPS细胞的技术已经存在了十年,并避免了围绕着“使用胚胎干细胞”出现的问题,这些问题阻碍了这些细胞的再生医学研究,因此临床调查一直是谨慎而缓慢的。iPS细胞可能无法正确地分化成所需的组织。此外,也有人担心由此产生的组织可能有不可预见的基因异常,或可能癌变。


    即使在临床应用以外,许多研究人员感兴趣的是,iPS细胞作为生成“培养皿疾病”的一种方式。研究人员不是从一名遗传疾病患者身上采集组织样本——当受影响的器官是大脑时,这是特别具有挑战性的,而是可以利用来自患者皮肤细胞的iPS细胞,制备所需的模型器官。观察这些组织的发展,可以提供关于疾病进展的线索,以及作为治疗的理想试验平台——没有批准用于人类。


    然而,在临床和研究应用中,允许产生“高质量”iPS细胞的特性,能够正确分化成所需的组织,而没有不清楚的基因异常。


    我们知道,在基因组拓扑结构和基因表达之间有一种,这激励着我们探索,在成熟脑细胞重编程为多能性的过程中,遗传物质在细胞核内的三维空间中是如何被重新配置的。


     研究人员,靶定了基因组上的几个区域,以进行他们的计算分析,从而将iPS细胞与生成它们的细胞、以及理想状态下它们应该完美复制的胚胎干细胞,进行了比较。

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     中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室王琳淇课题组在《自然-微生物学》(Nature Microbiology)以长文(Article)的形式发表了题为Cryptococcus neoformans sexual reproduction is controlled by a quorum sensing peptide的研究成果。


     该研究报道了第一例细胞密度感应信号(quorum sensing signal,也称为群感效应信号)依赖的真核有性生殖,揭示了细胞密度感应因子Qsp1作为关键胞外信号分子激发重要人类病原真菌新生隐球菌(年死亡人数超过20万,致死率20%-70%)的有性生殖和减数分裂过程。


     有性生殖是包括真菌在内的真核生命特有的基础繁殖方式。真菌作为遗传操作便利的优秀研究材料广泛地被应用于探索有性生殖在环境适应、物种进化以及感染疾病中所扮演的功能角色,其中人类病原真菌新生隐球菌是研究真菌有性生殖的模式菌之一。该病原菌具有两种交配型(α和a),可通过α-a异性生殖和α同性生殖两种模式进行有性生殖。自然界中超过99%的菌株为α交配型,故α同性生殖被认为是新生隐球菌的主要有性生殖方式。


     越来越多的研究表明,α同性生殖作为重要的适应性行为维系了新生隐球菌及其姊妹种格特隐球菌在宿主侵染方面的短期适应优势和长期种系优势:一是α同性生殖的产物同性孢子可作为重要的感染繁殖体参与早期宿主肺脏定植;二是α同性生殖作为隐球菌关键的进化动力通过创建遗传物质和核型多样化,推动了生态位扩展及毒力进化,并造成过北美严重的爆发性感染。

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    在人体内,铁是一种“热销货”。这种金属对DNA复制和能量产生十分重要。而细菌生长和分裂也需要铁,而且它们有一种特殊分子——嗜铁素,能将铁从蛋白质中剥离出来。然后,通过与专门的载体结合,嗜铁素能将这种“贵重货物”运回细菌细胞。


     来自美国密歇根大学的研究组研究出一种针对能引发尿路感染的大肠杆菌嗜铁素的疫苗,同时,麻省理工学院和加州大学欧文分校联合团队将目标放在了食物中毒“罪魁祸首”沙门氏菌上。他们首先用新疫苗为小鼠免疫,几周后为这些动物使用了大量细菌。


     这种针对嗜铁素的疫苗不能预防疾病,免疫后的老鼠仍被感染,其中一些症状严重。 但与对照组小鼠相比,接受疫苗的小鼠体内的细菌明显较少。例如,密歇根大学实验显示,与对照组相比,免疫后小鼠尿液和肾脏中的大肠杆菌少10倍,且感染症状较轻。


     研究人员表示,这些结果十分重要,但仍处于起步阶段。参与沙门氏菌研究的加州大学欧文分校微生物学家Manuela Raffatellu指出,“虽然风险很大,但它仍在起作用。”参与大肠杆菌研究的密歇根大学细菌学家Harry Mobley表示,“现在,它还没有为迎接黄金时段做好准备。但无论如何,我很兴奋。”


    研究人员希望,该疫苗从现在开始5年后能进行人体试验。而且,致病菌的近缘种通常产生化学性质相似的嗜铁素,一种疫苗或能对抗不同细菌。


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