孟加拉红培养基(虎红琼脂)使用说明书按成分可为三大培养基分类：
1) 合成培养基：
各种成分完全是已知遥各种化学物质 组成成分精确 重复性强。
2) 天然培养基：
由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定 但配制方便 营养丰富培养效果好 常常被采用。
3) 半合成培养基：
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类 或在合成培育基的基础上添加某些天然成分 更能有次的满足微生物对营养的需要。

公司实验室

孟加拉红培养基(虎红琼脂)
(RoseBengalAgar)

用途：

孟加拉红培养基供霉菌和酵母的计数、分离和培养用(GB/T4789.15-2010和化妆品卫生规范微生物检验方法2007版)。

原理：

蛋白胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;磷酸二氢钾为缓冲剂;硫酸镁提供必须的微量元素;琼脂是培养基的凝固剂;氯霉素可;孟加拉红作为选择性抑菌剂可，并可减缓某些霉菌因而导致菌落漫延生长。

孟加拉红培养基配方(每升)：

蛋白胨5g

葡萄糖10g

磷酸二氢钾1g

硫酸镁0.5g

琼脂15g

孟加拉红0.03g

氯霉素0.1g

最终pH 7.2±0.2

使用方法(计数用法)：

1、称取孟加拉红培养基31.6g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min。

2、无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL灭菌水的玻璃三角瓶中，振摇30min，即为1：10稀释液，依次做1：100、1：1000……稀释。

3、根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

4、将凉至45℃左右的培养基注入平皿中，待琼脂凝固后，倒置于25—28℃温箱中培养。

5、3d后开始观察结果，共培养观察5d。

6、计算方法：通常选择菌落数在10—150之间的平皿进行计数(如食品卫生国家标准)，也有选用5—50个之间的平皿进行计数(化妆品卫生规范)，同稀释度的2个平皿菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克(或每mL)检样中所含霉菌和酵母菌数。

实验方法：
1.培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件：
   无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
   MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
   控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
   倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
   倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
孟加拉红培养基(虎红琼脂)使用说明书培养基制备的标准操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，放入一定量的培养基干粉，轻轻搅拌以促进溶解；
↓高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH值；
↓液体培养基一般要在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。
↓质量检查
    →将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格。
    →按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。
↓液体培养基及琼脂平板须在40℃的条件下保存，保质期一般为一周，如用塑料袋密封，则至多可以保存2周的时间。

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