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SK-GT-2厂家
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  • 供货能力:电询
  • 最低订购量:1盒
  • 可销售总数量:54盒
  • 建议零销价:电询元/盒
  • 发布日期: 2020-06-10
  • 更新日期: 2020-12-15
产品详细说明
品牌: 莼试 CAS编号:
产地: 进口、国产 货号: CSX4416
纯度: 详见说明书 % 用途范围: 公司产品仅用于科研
规格: 详见说明书 是否进口:
组织来源: 详见说明书 是否是肿瘤细胞:
细胞形态: 生长状态: 贴壁
器官来源: 详见说明书 品系: 详见说明书
免疫类型: 详见说明书 物种来源: 详见说明书
保存条件: 保质期: 详见说明书

SK-GT-2厂家冷冻保存细胞之方法:

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 30~60 分钟-20 30 分钟* → -80 16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤:

资源名称 SK-GT-2厂家
种属:人胃癌细胞

类型:贴壁

安全等级:1

模式菌株:未知

培养方法

培养基:56

传代方法:Protocol: 1.吸走完全培养基,轻柔加入3-5mL PBS润洗细胞以除去多余培养基; 尽量吸干净PBS,然后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没所有细胞表面,37度培养箱消化到细胞相互分离; Note:为避免细胞消化过度,细胞消化到相互分离,可以轻轻吹下即可终止,严禁消化到细胞完全漂浮。传代过程吹打细胞应尽量轻柔,不应吹出过多气泡。 2.加入6-8ml完全培养基终止消化,并轻轻混匀细胞; 3.将细胞悬液1000rpm(约150g)离心3min,弃上清; 4.用新的完全培养基重悬细胞并均匀分成几份,37度培养箱继续培养; 传代比例: 视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代。

生长条件:Complete growth medium: 164090%FBS10%;双抗。 Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
细胞分类:
第一种:
是冻存产品,由氮直液接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)
第二种:产品仅用于科研
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)
质量保证:我们的细胞株来源于ATCCECACCDSMZJCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程:

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1
)准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)85%;北美胎牛血清(United StatesGIBCO,货号16000-044)15%
2
)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%
3
)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1
)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.
2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按1215的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
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收到SK-GT-2厂家处理方法
产品仅用于科研1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2
、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3
、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4
、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5
、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6
、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。



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