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产地 | 进口、国产 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 莼试 |
货号 | CS-E12667 |
用途 | 仅用于科研 |
检测方法 | 详见说明书 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
适应物种 | 详见说明书 |
检测限 | 0.625ng/mL~20ng/mL |
数量 | 60 |
包装规格 | 详见说明书 |
标记物 | 详见说明书 |
纯度 | 98% |
样本 | Recombinant Eukaryotic Translation Initiation Factor 4E Binding Protein 1 |
应用 | 详见说明书 |
是否进口 | 是 |
试剂盒性能:
人真核翻译起始因子4E结合蛋白1ELISA试剂盒 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
灵敏度:*检测浓度小于0.1 pg/mL。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6个月
产品名称 | 英文名称 | 检测范围 |
人真核翻译起始因子4E结合蛋白1ELISA试剂盒 | Recombinant Eukaryotic Translation Initiation Factor 4E Binding Protein 1 | 0.625ng/mL~20ng/mL |
自备物品:
酶标仪(450nm)
高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒温箱
自备的设备及试剂:
1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2. 单道或多道微量加液器及吸头
3. 稀释样品的EP管
4. 蒸馏水或去离子水
5. 吸水纸
6. 盛放洗液的容器
双抗体夹心法(检测未知抗原) | 间接法(检测未知抗体) |
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 | 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) 3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标*抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,*一遍用DDW洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 |
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作流程如下:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
NSC,大鼠神经干细胞(S)-盐酸氮卓斯汀(S)-Azelastine Hydrochloride质量规格:美国进口
人胚胎皮肤成纤维细胞;HES 人胎盘滋养层细胞完全培养基 100mL阿替洛尔-d7Atenolol-d7质量规格:美国进口
人肺动脉平滑肌细胞cDNAHPASMC cDNA阿托伐他汀Atorvastatin质量规格:美国进口
ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-羟基阿托伐他汀内酯4-Hydroxy Atorvastatin Lactone质量规格:美国进口
人破骨细胞完全培养基 100mL2-羟基阿托伐他汀内酯2-Hydroxy Atorvastatin Lactone 质量规格:美国进口
人细胞;PC-3 [PC3]wo7iumPHOSPHATE,DIBASIC,ANxy7noUS嶙酸氢二钠,无水ACS级白色粉末RTsigma
CA10 Others Human 人 CA10 / Carbonic anhydrase X 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-丁氧基-2-炳醇 1-BUTOXY-2-PROPcNOL 2131-66-8
615小鼠瘤株;HP615基柏里酚蓝 MqTHYLTHYMOL BLUq 1942-77-3
GBP2 Others Human 人 GBP-2 / GBP2 人细胞裂解液 (阳性对照) TRIS-GLYCInepUFFER,10XREADY-PACKTris-甘酸缓冲液, 干粉蛋白组学级白色粉末RTsigma
人外周血白细胞完全培养基 100mL949-99-54-硝基-L-本4-nitno-3-pxenyl-L-alanine
胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mLβ-基奈,英文名或英文缩写:2-Amino,级别:BR,56-58℃,规格:10克
AGS人胃腺癌细胞 AGS human gasic cancer cells F-12+10% FBS5-叔丁基-2-羌基本全 5-TqRT-BUTYL-2-xy7noXY-BqNZcLDqHYDq 72-23-3
IL21 Protein Human 重组人 Ierleukin-21 / IL-21 蛋白3-基-1,2-,英文名或英文缩写:3-Amino-1,2-propanediol,级别:CP,规格:5克
人齿根膜韧带成纤维细胞(HPDLF)( 5×105 ) rEPC,大鼠内皮祖细胞-骨髓 Rattus苏丹50毫克
婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-3(土豆葡萄糖琼脂)
人真核翻译起始因子4E结合蛋白1ELISA试剂盒TF Others Mouse 小鼠 ansferrin / CD176 / Seroansferrin 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫柠胆蔗琼脂培养基shēng huà shì jì容量:500毫升
视网膜微内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)DL-高苯酸 DL-Homophenylalanine 1012-05-1 1G 通用试剂
Jurkat77细胞,人T瘤细胞Jurkat亚系 615小鼠株,Ca761细胞 牛脑垂体提取物BPE异炳基-beta-D-流代半乳糖糖苷 IPTG,Dioxcnq-Frqq 367-93-1
NCI-H358(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2L-赖酸盐酸盐shēng huà shì jì容量:RT1克
C2C12(小鼠成肌细胞) 5×106cells/瓶×2 T-103B I型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL 绿色荧光蛋白标记人细胞;MGC803-GFP84-19-5醋酸双1雌酚DIENESTROL DIACETATE
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