elisa试剂盒-上海莼试生物技术有限公司

产品展厅

elisa试剂盒

品牌：莼试

产地：国产

型号：48T/96T

货号：CS-E001

发布日期： 2018-08-28
更新日期： 2025-07-04

发送咨询信息

产品详请

产地	国产
保存条件	2-8℃。
品牌	莼试
货号	CS-E001
用途	仅科研研究实验
检测方法	夹心法、竞争法、捕获法等
保质期	6个月
适应物种	人、大鼠、小鼠等
检测限	血清、血浆、唾液、尿液、动物组织、细胞培养上清等
数量	30
包装规格	48T/96T
标记物	HRP等
样本	血清、血浆、唾液、尿液、动物组织、细胞培养上清等
应用	ELISA
是否进口	否

elisa试剂盒

使用目的：
本试剂盒用于测定血清样本elisa试剂盒水平水平含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中elisa试剂盒水平水平。用纯化的elisa试剂盒抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入elisa试剂盒，再与HRP标记的elisa试剂盒抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的elisa试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中elisa试剂盒浓度。
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.稀释：本试剂盒提供原倍一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于孔孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：2-8℃。
2．有效期：6个月

结果的计算
计算标准品和样本复孔的平均OD值并减去空白孔的OD值作为校正值。以浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出四参数逻辑函数的标准曲线(作图时去掉空白组的值)。或者使用能够生成四参数逻辑（4-P）曲线拟合的计算机软件来创建标准曲线。
若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测并在计算样本浓度时乘以相应的稀释倍数。

本图所示标准曲线仅供示例，结果计算应以同次试验标准品所绘标准曲线为准计算样本结果。
重复性
板内变异系数小于10%，板间变异系数小于10%。
回收率
回收率在不同基质的整个测定范围内选取在健康小鼠血清、血浆和细胞培养上清中加入3个不同浓度水平计算回收率。
灵敏度
经样本测试，本试剂盒的检测灵敏度为0.15625ng/mL。
线性关系
分别在选取的4份健康小鼠血清、血浆和细胞培养上清中加入高浓度AChE，在标准曲线动力学范围内进行稀释，评估线性。

特异性
该试剂盒测定可识别重组小鼠AChE。
其他相关蛋白在稀释缓冲液中制备为50ng/mL，并测定交叉反应性。没有观察到明显的交叉反应。