抗体的生物素化标记实验要点：

1. 磷酸化一氧化氮合成酶3（内皮型）抗体规格 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及*基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-Phospho-eNOS (Thr495) 

中文名称   磷酸化一氧化氮合成酶3（内皮型）抗体规格 

别    名  eNOS (phospho T495); p-eNOS (phospho T495); eNOS (Phospho-Thr495); cNOS; eNOS; Constitutive NOS; EC NOS; ecNOS; Endothelial nitric oxidase synthase; Endothelial nitric oxide synthase; Endothelial nitric oxide synthase 3; Endothelial NOS; Nitric oxide synthase 3 (endothelial cell); Nitric oxide synthase 3; Nitric oxide synthase 3 endothelial cell; Nitric oxide synthase endothelial; nitric oxide synthase, endothelial; NOS 3; NOS III; NOS type III; NOS3; NOSIII; NOS3_HUMAN.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.1ml/100μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, Guinea Pig 

产品类型   一抗 磷酸化抗体  

研究领域    免疫学 神经生物学 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶

蛋白分子量  predicted molecular weight: 133kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human eNOS around the phosphorylation site of Thr495 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

磷酸化一氧化氮合成酶3（内皮型）抗体规格 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 eNOS is a calcium/calmodulin dependent enzyme which undergoes several post translational modifications, including acylation with myristate and palmitate, and phosphorylation on numerous residues. As with the other members of the NOS family, eNOS derives the diffusible multifunctional second messenger NO from L arginine through a series of reactions in which L citrulline is an intermediate. eNOS plays an important role in controlling vascular tone, platelet aggregation, and cardiac myocyte function.

Function : Produces nitric oxide (NO) which is implicated in vascular smooth muscle relaxation through a cGMP-mediated signal transduction pathway. NO mediates vascular endothelial growth factor (VEGF)-induced angiogenesis in coronary vessels and promotes blood clotting through the activation of platelets.Isoform eNOS13C: Lacks eNOS activity, dominant-negative form that may down-regulate eNOS activity by forming heterodimers with isoform 1.Subunit : Homodimer. Interacts with NOSIP and NOSTRIN.Subcellular Location : Cell membrane. Membrane, caveola. Cytoplasm, cytoskeleton. Golgi apparatus. Note=Specifically associates with actin cytoskeleton in the G2 phase of the cell cycle; which is favored by interaction with NOSIP and results in a reduced enzymatic activity.Tissue Specificity : Platelets, placenta, liver and kidney.Post-translational modifications : Phosphorylation by AMPK at Ser-1177 in the presence of Ca(2+)-calmodulin (CaM) activates activity. In absence of Ca(2+)-calmodulin, AMPK also phosphorylates Thr-495, resulting in inhibition of activity. Phosphorylation of Ser-114 by CDK5 reduces activity.Similarity : Belongs to the NOS family.Contains 1 FAD-binding FR-type domain.Contains 1 flavodoxin-like domain.Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P29474.3 humanUniProtKB/Swiss-Prot: Q62600.4 ratUniProtKB/Swiss-Prot: P70313.4 mouse催化生物体内一氧化氮（NO）生成的酶。分神经型一氧化氮合成的酶（nNOS or NOS-1）、诱导型一氧化氮合成的酶（iNOS or NOS-2）、内皮型一氧化氮合成的酶（eNOS or NOS-3）。此抗体识别分子量为135kDa的内皮型一氧化氮合成的酶。

抗体的鉴定：

1）磷酸化一氧化氮合成酶3（内皮型）抗体规格 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

Anti-Phospho-EphA2 (Tyr594) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化酪氨酸蛋白激酶A2受体抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-Phospho-MSK1 (Ser360)/FITC 荧光素标记磷酸化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C1orf51 1号染色体开放阅读框51抗体 规格 0.2ml

TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2) 胶质细胞系源性神经营养因子(多肽) 0.5mg

HLC3 英文名称： 癌基因蛋白3抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh RSRC2 蛋白抗体 规格 0.2ml

Anti-Phospho-MSK1 (Ser360)/FITC 荧光素标记磷酸化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

VWF (Von Willebrand Factor) 假性因子/性因子抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-Caveolin-1 细胞质膜微囊蛋白-1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PCGF1 表观抑制因子Polycomb家族成员PCGFl蛋白抗体 规格 0.2ml

PRLR Kit Human 人 PRLR / Prolactin Receptor ELISA配对抗体 ELISA

TLR7 英文名称： Toll样受体7抗体 0.1ml

caspase-8 subunit p18 英文名称： 半胱酸蛋白酶8抗体 0.2ml

Anti-Caveolin-1 细胞质膜微囊蛋白-1抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Sema3A (semaphorin 3A) 臂板蛋白3A(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-BECN1 BECLIN-1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PGT/Slco2a1 溶质载体蛋白家族21成员2抗体 规格 0.2ml

Glutathione S-Transferase pi1:60 浓缩液 0.1ml 进口分装

UCHL5IP 英文名称： 泛素羧基末端水解酶5互相作用蛋白1抗体 0.2ml

phospho-Caveolin-2(Tyr19) 英文名称： 磷酸化细胞质膜微囊蛋白-2抗体 0.1ml

Anti-BECN1 BECLIN-1抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

TNFSF11 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 标签)

caski

ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 人细胞裂解液 (阳性对照)

Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒构建稳定株)小鼠细胞 Hepa1-6-EGFP (CMV-GFP leiviral consuct stable sain) of hepatocellular carcinoma cells in mice DMEM+10% FBS

小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH3

人主动脉平滑肌细胞 (HASMC)( 5×105 ) HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞 Human

CL-0462UMR-106(大鼠细胞)5×106cells/瓶×2

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人髓核细胞RNAHNPC miRNA5 μg

兔角膜前基质层成纤维细胞;RCFBF 癌细胞，MCF7细胞 Cl.Ly1+2-/9细胞，小鼠T淋巴细胞

人脐内皮细胞;HUV-EC-C

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)

磷酸化一氧化氮合成酶3（内皮型）抗体规格 TNFSF11 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 标签)

caski

ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 人细胞裂解液 (阳性对照)

Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒构建稳定株)小鼠细胞 Hepa1-6-EGFP (CMV-GFP leiviral consuct stable sain) of hepatocellular carcinoma cells in mice DMEM+10% FBS

小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH3

人主动脉平滑肌细胞 (HASMC)( 5×105 ) HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞 Human