抗体的生物素化标记实验要点：

1. 跨膜蛋白Orai2抗体说明书 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及*基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-Orai2 

中文名称   跨膜蛋白Orai2抗体说明书 

别    名  C7orf19; CAP binding protein complex interacting protein 2; CBCIP 2; CBCIP2; Chromosome 7 open reading frame 19; FLJ12474; FLJ14733; FLJ44818; H_NH0514P08.8; Orai 2; ORAI calcium release activated calcium modulator 2; Protein orai 2; TMEM 142B; TMEM142B; Transmembrane protein 142B.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep 

产品类型   一抗  

研究领域    细胞生物 免疫学 通道蛋白

蛋白分子量  predicted molecular weight: 29kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Orai2 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

跨膜蛋白Orai2抗体说明书 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 Orai2 is a 254 amino acid multi-pass membrane protein that belongs to the orai family of proteins. Localizing to the plasma membrane, Orai2 plays an important role in store-operated calcium (SOC) entry, a process involving Ca2+ influx and replenishment of Ca2+ stores formerly emptied through the action of inositol 1,4,5-trisphosphate production and other Ca2+ mobilizing agents. CRAC channels are responsible for medi-ating calcium influx in T-cells and play an important role in the immune response. Orai2 specifically increases the Ca2+-selective current through coaction with the Ca2+ sensor Stim1.

Function : Ca(2+) release-activated Ca(2+)-like (CRAC-like) channel subunit which mediates Ca(2+) influx and increase in Ca(2+)-selective current by synergy with the Ca(2+) sensor, STIM1.

Subunit : Interacts with EFCAB4B/CRACR2A.

Subcellular Location : Membrane; Multi-pass membrane protein.

Similarity : Belongs to the Orai family.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q96SN7.1

抗体的鉴定：

1）跨膜蛋白Orai2抗体说明书 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

PAP(Human Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit 人酸性磷酸酶Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干细胞关键蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh IDH2 草酰琥珀酸脱羧酶抗体 规格 0.1ml

TRACP-5b(Mouse tartrate-resistant acid phosphatase 5b)ELISA Kit 小鼠抗酸性磷酸酶5b 96T

PCDH12 英文名称： 原钙粘附蛋白12/内皮钙粘蛋白2抗体 0.1ml

C9orf86 英文名称： 9号染色体开放阅读框86抗体 0.2ml

Anti-Oct-4(Octamer-4) 胚胎干细胞关键蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

cyclin D1 周期素D1(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-phospho-CBL2(Tyr731) 磷酸化原癌蛋白CBL2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCDHB5 原钙粘蛋白β5抗体 规格 0.2ml

CD97 Kit Human 人 CD97 ELISA配对抗体 ELISA

TNRC6B 英文名称： 三核苷酸重复蛋白6B抗体 0.2ml

COPS2 英文名称： 甲状腺受体相互作用蛋白15抗体 0.2ml

Anti-phospho-CBL2(Tyr731) 磷酸化原癌蛋白CBL2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

PHB(Prohibitin) 抑制素/抑制因子抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-AVEN 凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制剂抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 磷酸化间变型激酶抗体 规格 0.1ml

Myelin Basic Protein 浓缩液 0.1ml 进口分装

UPK3A 英文名称： 尿路上皮特异蛋白3抗体 0.1ml

DLK1 英文名称： 穿膜蛋白DLK1抗体 0.1ml

Anti-AVEN 凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制剂抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

SCG2 Protein Human 重组人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 标签)

Jurkat(悬浮) 急性T淋巴细胞

IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照)

PC-3人细胞 Human prostate cancer PC-3 cells F-12培养基+10%FBS

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1

小鼠腹脊髓神经细胞(MN-vsc)(1×106) lovo, 人细胞 Human

CL-0345HB611(人细胞)5×106cells/瓶×2

MFI2 Others Mouse 小鼠 MFI2 / CD228 / melanoansferrin 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠肺大动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL

C3H/10T1/2, Clone 8小鼠胚胎成纤维细胞 C3H/10T1/2, Clone 8 mouse embryonic fibroblast MEM培养基(GIBCO)+10%FBS

IL1B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白

NCI-H520(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 T/G HA-VSMC(人主动脉平滑肌细胞)

跨膜蛋白Orai2抗体说明书 SCG2 Protein Human 重组人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 标签)

Jurkat(悬浮) 急性T淋巴细胞

IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照)

PC-3人细胞 Human prostate cancer PC-3 cells F-12培养基+10%FBS

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1

小鼠腹脊髓神经细胞(MN-vsc)(1×106) lovo, 人细胞 Human