抗体的生物素化标记实验要点：

1. 磷酸化蛋白激酶C亚性抗体规格 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及*基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-Phospho-PRKACB(Thr198) 

中文名称   磷酸化蛋白激酶C亚性抗体规格 

别    名  Phospho-PKA alpha + beta(Thr198); C alpha; cAMP dependent protein kinase beta catalytic subunit; cAMP dependent protein kinase alpha catalytic subunit; cAMP dependent protein kinase catalytic subunit alpha; cAMP dependent protein kinase catalytic subunit beta; Cs; PKA; PKA C; PKA C alpha; PKA C beta; PKACA; PKACB; PRKACA; PRKACB; Protein kinase cAMP dependent catalytic alpha; Protein kinase cAMP dependent catalytic beta; Protein kinase cAMP dependent catalytic beta isoform a; Protein kinase cAMP dependent catalytic beta isoform b.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.1ml/100μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow 

产品类型   一抗 磷酸化抗体  

研究领域     免疫学 信号转导 转录调节因子 激酶和磷酸酶

蛋白分子量  predicted molecular weight: 42kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human PRKACB around the phosphorylation site of Thr198 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

磷酸化蛋白激酶C亚性抗体规格 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 PRKACA and PRKACB are members of the Ser/Thr protein kinase family and are a catalytic subunit of cAMP-dependent protein kinase. cAMP is a signaling molecule important for a variety of cellular functions. cAMP exerts its effects by activating the cAMP-dependent protein kinase, which transduces the signal through phosphorylation of different target proteins. The inactive kinase holoenzyme is a tetramer composed of two regulatory and two catalytic subunits. cAMP causes the dissociation of the inactive holoenzyme into a dimer of regulatory subunits bound to four cAMP and two free monomeric catalytic subunits.

PKA alpha + beta (catalytic subunits) (phospho Thr198)

抗体的鉴定：

1）磷酸化蛋白激酶C亚性抗体规格 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

IL-12/P70(Human Interleukin 12) ELISA KIT 人白介素12Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-GPR109A/HM74A G蛋白偶联受体109A抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Monoacylglycerol Lipase 单酰甘油脂肪酶抗体 规格 0.2ml

UP(Human Proteinuria) ELISA Kit 人 96T

RSRC2 英文名称： 蛋白抗体 0.2ml

Phospho-c-Kit(Tyr721) 英文名称： 磷酸化原癌基因c-kit抗体 0.1ml

Anti-GPR109A/HM74A G蛋白偶联受体109A抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

TFF3 (trefoil factor3) 三叶肽因子3(多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-BSEP 胆汁酸盐输出泵蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PDZD8 PDZ结构域PDZK8蛋白抗体 规格 0.2ml

CD20 浓缩液 0.1ml 进口分装

TSARG3 英文名称： 生精细胞凋亡相关基因3抗体 0.1ml

CD46/MCP 英文名称： 膜辅蛋白抗体 0.2ml

Anti-BSEP 胆汁酸盐输出泵蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit 大鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1Multi-class antibodies规格： 48T

anti-AQP1/FITC 荧光素标记水通道蛋白-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FAM3A *衍生因子抗体 规格 0.1ml

sEPCR(Mouse soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 小鼠可溶性内皮细胞蛋白C受体 96T

Phospho-MAP3K8 (Ser400) 英文名称： 磷酸化原活化蛋白激酶激酶8抗体 0.1ml

ALDH2 英文名称： 乙醛脱氢酶2抗体 0.1ml

anti-AQP1/FITC 荧光素标记水通道蛋白-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

正常细胞

CAM191 EBV-转化人淋巴细胞

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 (aa 1-208) 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0094HCC827(人非小细胞细胞)5×106cells/瓶×2

人少突胶质前体细胞-悬浮生长裂解物HOPC-os L

人原胚肾转化细胞;293 Ad5 人脐内皮细胞完全培养基 100mL

CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2

KIR2DL4 Others Human 人 KIR2DL4 / CD158D CHO细胞裂解液 (阳性对照)

人表皮黑色素细胞-浅色素裂解物HELM-l L

新生牛眼晶体上皮细胞;NBLE 人细胞，SW579细胞 RIN-m5F细胞，小鼠β瘤细胞

人膀胱上皮永生化细胞;SV-HUC-1

EPHA4 Others Human 人 EPHA4 人细胞裂解液 (阳性对照)

磷酸化蛋白激酶C亚性抗体规格 正常细胞

CAM191 EBV-转化人淋巴细胞

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 (aa 1-208) 人细胞裂解液 (阳性对照)

CL-0094HCC827(人非小细胞细胞)5×106cells/瓶×2

人少突胶质前体细胞-悬浮生长裂解物HOPC-os L

人原胚肾转化细胞;293 Ad5 人脐内皮细胞完全培养基 100mL