抗体的生物素化标记实验要点：

1. 蛋白酶活化受体4抗体说明书 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及*基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-PAR4 

中文名称   蛋白酶活化受体4抗体说明书 

别    名  protease-activated receptor 4; 2310001G03Rik; PAR 4; Par4 induced by effectors of apoptosis; PAWR; PRKC Apoptosis WT1 Regulator; PRKC apoptosis WT1 regulator protein; Prostate apoptosis response 4 protein; Prostate apoptosis response protein 4; Prostate apoptosis response protein PAR 4; Proteinase-Activated Receptor 4; Transcriptional repressor Par-4-like protein PAWR; TRANSCRIPTIONAL REPRESSOR PAR4; WT1 Interacting Protein; PAR-4.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Guinea Pig 

产品类型   一抗  

研究领域    细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶 细胞膜受体

蛋白分子量  predicted molecular weight: 37kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PAR4 C-terminus 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

蛋白酶活化受体4抗体说明书 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 PAR4 is a member of a unique family of GPCRs, the proteinase-activated receptors (PARs), that are activated by proteolytic cleavage of the N-terminal domain of the receptor to reveal a tethered ligand. The PAR family consists of 4 receptors; PAR1 and PAR3 are activated by thrombin, and PAR2 and PAR4 are activated by several serine proteases (Macfarlane et al., 2001). PAR4 is expressed along with PAR1 on human platelets, and each plays an important role in thrombin-induced platelet aggregation (Holinstat et al., 2006). However, platelets from mice express PAR4 but not PAR1, and platelets from mice lacking PAR4 fail to aggregate in response to thrombin (Sambrano et al., 2001). Mice lacking PAR4 are protected from mesenteric arteriole thrombosis, indicating that PAR4 is a potential target for treatment of thrombosis in humans.

Function : Receptor for activated thrombin or trypsin coupled to G proteins that stimulate phosphoinositide hydrolysis. May play a role in platelets activation.

Subcellular Location : Cell membrane; Multi-pass membrane protein.

Tissue Specificity : Widely expressed, with highest levels in lung, pancreas, thyroid, testis and small intestine. Not expressed in brain, kidney, spinal cord and peripheral blood leukocytes. Also detected in platelets.

Similarity : Belongs to the G-protein coupled receptor 1 family.

蛋白酶活化受体-4(细胞凋亡反应蛋白4)是蛋白酶活化受体PARs (protease-activated receptors , PARs)的成员之一，PAR4在激活、灭活、脱敏、复敏、及其与信号转导途径的关系,尤其是与疾病的关系正倍受关注。

PAR4具有广泛的生物学效应,最终影响细胞的形态的改变、分泌蛋白和整合蛋白的活化、代谢反应、转录过程和细胞运动，由此参与细胞的信号转导作用。

抗体的鉴定：

1）蛋白酶活化受体4抗体说明书 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

Anti-Eukaryotic aspartyl protease/FITC 荧光素标记天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-CHRNA7/FITC 荧光素标记型乙酰胆碱受体α7抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C17orf75 17号染色体开放阅读框75抗体 规格 0.2ml

PTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor ) 蛋白酪酸磷酸酶-1B(抗原) 0.5mg

HRPT2 英文名称： 蛋白2/细胞分裂周期73抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh ROM-K/KCNJ1 ATP调节离子通道ROM K抗体 规格 0.2ml

Anti-CHRNA7/FITC 荧光素标记型乙酰胆碱受体α7抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-MCT1/FITC 荧光素标记单羧酸转运蛋白-1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-Phospho-TLK1 (Ser695)/FITC 荧光素标记磷酸化调节染色体组装激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Aconitase 2/ACO2 铁调节蛋白2抗体 规格 0.2ml

Rabbit Anti-Bov IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗IgG 0.1ml

GPR45 英文名称： G蛋白偶联受体45抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Biotin/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗生物素抗体IgG 规格 0.1ml

Anti-Phospho-TLK1 (Ser695)/FITC 荧光素标记磷酸化调节染色体组装激酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

ACO-2(Human aconitase 2) ELISA Kit 人乌头酸酶2Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Nonylphenol 任基酚抗体Multi-class antibodies规格： 0.2mg

Rhesus antibody Rh IGSF6 免疫球蛋白超家族成员6抗体 规格 0.2ml

PTH ELISA Kit 大鼠甲状旁腺激素 96T

phospho-PIK3R1(Tyr556) 英文名称： 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗体 0.1ml

CIDEB 英文名称： CIDEB抗体 0.2ml

Anti-Nonylphenol 任基酚抗体Multi-class antibodies规格： 0.2mg

CL-0342H4-II-E-C3(大鼠细胞 )5×106cells/瓶×2

PDGFRB Others Human 人 PDGFRB / PDGFR-1 / CD140b 人细胞裂解液 (阳性对照)

人肺微内皮细胞总RNAHPMEC NA

HCC1937细胞，人癌细胞 鼠胸腺激酶缺陷细胞株,L-MTK细胞 原代细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml

M-NFS-60 (小鼠细胞G-CSF依赖性) 5×106cells/瓶×2

HDBEC adult Pellet 人皮肤内皮细胞团块(成年捐献者) > 1 mio.cells 间充质干细胞软骨细胞分化培养基MCDM-prf

CL-0339G-401(人Wilms细胞)5×106cells/瓶×2

PHKG1 Others Human 人 PHKG1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人食道平滑肌细胞总RNAHESMC NA

RD细胞，恶性胚胎横纹肌瘤 人细胞系,Tul-1细胞 原代软骨细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml

豹猫肺成纤维样细胞;LCL2

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)

蛋白酶活化受体4抗体说明书 EFNA1 Others Rat 大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 人细胞裂解液 (阳性对照)

脐动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

大鼠输尿管上皮细胞完全培养基 100mL

OKT 11杂交瘤细胞抗CD2 OKT 11 hybridoma cells against CD2 IMDM培养基(GIBCO)+20%FBS

IGFBP4 Protein Human 重组人 IGFBP4 蛋白 (His 标签)

HFF-1(人成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 克雷伯杆菌