抗体的生物素化标记实验要点：

1. 脯氨酸水解酶4抗体品牌 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及*基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-P4HTM 

中文名称   脯氨酸水解酶4抗体品牌 

别    名  Transmembrane prolyl 4-hydroxylase; Proline hydrolase 4; proline 4-hydroxylase; P4htm; hypoxia-inducible factor prolyl 4-hydroxylase; P4H-TM; HIF-prolyl hydroxylase PH-4; P4HTM_HUMAN; Hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase 4; HIF-PH4; HIF-prolyl hydroxylase 4; HPH-4; transmembrane prolyl 4-hydroxylase isoform a; P4HTM; EGLN4; HIFPH4; P4H-TM; PH-4; PH4; PHD4; P4H with transmembrane domain; Prolyl hydroxlase domain-containing 4; hypoxia inducible factor prolyl 4 hydroxylase; HIF-prolyl hydroxylase 4.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit 

产品类型   一抗  

研究领域    细胞生物 合成与降解

蛋白分子量  predicted molecular weight: 55kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PH-4 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

脯氨酸水解酶4抗体品牌 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 The product of this gene belongs to the family of prolyl 4-hydroxylases. This protein is a prolyl hydroxylase that may be involved in the degradation of hypoxia-inducible transcription factors under normoxia. It plays a role in adaptation to hypoxia and may be related to cellular oxygen sensing. Alternatively spliced variants encoding different isoforms have been identified. [provided by RefSeq, Jul 2008].

Function : Catalyzes the post-translational formation of 4-hydroxyproline in hypoxia-inducible factor (HIF) alpha proteins. Hydroxylates HIF1A at 'Pro-402' and 'Pro-564'. May function as a cellular oxygen sensor and, under normoxic conditions, may target HIF through the hydroxylation for proteasomal degradation via the von Hippel-Lindau ubiquitination complex.

Subunit : Homodimer.

Subcellular Location : Endoplasmic reticulum membrane; Single-pass type II membrane protein.

Post-translational modifications : Glycosylated.

Similarity : Contains 2 EF-hand domains.

Contains 1 Fe2OG dioxygenase domain.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q9NXG6.2

抗体的鉴定：

1）脯氨酸水解酶4抗体品牌 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

Anti-factor X III /FITC 荧光素标记凝血因子ⅩⅢ抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-CD171/NCAM-L1/FITC 荧光素标记神经细胞粘附分子配体1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C16orf61 16号染色体开放阅读框61抗体 规格 0.2ml

BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受体1A抗原 0.5mg

HPR 英文名称： 结合珠蛋白相关蛋白抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh RNF70 环指蛋白70抗体 规格 0.2ml

Anti-CD171/NCAM-L1/FITC 荧光素标记神经细胞粘附分子配体1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

MC Ab ELISA Kit 大鼠黑色素细胞抗体Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr996) 磷酸化内皮生长因子受体2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Galectin 8 半乳糖凝集素8抗体 规格 0.2ml

CD20(Rat Troponin T) ELISA Kit 小鼠CD20分子 96T

NPTX1 英文名称： 神经细胞正五聚体1抗体 0.1ml

phospho-ATG4A(Ser100) 英文名称： 磷酸化自噬相关蛋白4A抗体 0.1ml

Anti-phospho-VEGF receptor 2 (Tyr996) 磷酸化内皮生长因子受体2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

irGH(Human Immunoreactive growth hormone) ELISA Kit 人免疫反应性生长激素Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-LDH 乳酸脱氢酶抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh KMT8/Riz1/Riz2 转录因子GATA3结合蛋白G3B抗体 规格 0.2ml

ADM(Human adrenomedullin) ELISA Kit 人肾上腺髓质素 96T

Phospho-PNK1 (Ser114 + Thr118) 英文名称： 磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗体 0.1ml

Alpha chimerin 英文名称： α1-chimaerin蛋白抗体 0.2ml

Anti-LDH 乳酸脱氢酶抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

CL-0402NCI-H520(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2

IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人细胞裂解液 (阳性对照)

小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基 100mL

U266人细胞 U266 human myeloma cell 1640+15% FBS

IL33 Protein Canine 重组狗 IL33 / Ierleukin-33 / NF-HEV 蛋白

NCI-H2227(人小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2 KG-1(细胞)

CL-0400NCI-H358(人非小细胞细胞)5×106cells/瓶×2

ALCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 ALCAM / CD166 人细胞裂解液 (阳性对照)

人小脑颗粒细胞RNAHCGC miRNA5 μg

MCF-7/ER36细胞，人癌细胞 小鼠瘤β细胞(NOD/Lt转基因小鼠，SV40巨T抗原),NIT-1细胞 MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞

MKN-28(人高转移细胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪细胞培养基PAM

脯氨酸水解酶4抗体品牌 IL18RAP Others Mouse 小鼠 IL18RAP / IL1R7 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

肾小管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C4

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36 细胞，C127细胞 J774A.1细胞，鼠腹水单核细胞瘤

人胚;WI-38 [WI38]

DCN Others Human 人 Decorin / DCN / SLRR1B 人细胞裂解液 (阳性对照)