抗体的生物素化标记实验要点：

1. 磷酸二酯酶4A8抗体说明书 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及*基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-PDE4A8 

中文名称   磷酸二酯酶4A8抗体说明书 

别    名  2EL; DPDE2; PDE4; PDE46; PDE4A; Phosphodiesterase 4A; Phosphodiesterse Type 4A8; PDE4A_HUMAN.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep 

产品类型   一抗  

研究领域    细胞生物 信号转导 细胞周期蛋白 细胞分化

蛋白分子量  predicted molecular weight: 98kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PDE4A8 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

磷酸二酯酶4A8抗体说明书 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1:20-100 IF=1:50-200

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 The PDE4A8 is a testis germ cell-specific PDE4A variant. There are two PDE4A variants identified in rat testis (PDE4A8 and an un-characterized 76 kDa PDE4A protein). Spermatogenesis is accompanied by expression of a varied repertoire of PDE4 enzymes at different stages of cell differentiation that presumably perform specialized functions. Confocal microscopic examination revealed the presence of PDE4A8 in primary and secondary spermatids but not in mature spermatozoa. PDE4A8 inhibition results in increased apoptosis of the germ cells accompanied with reduction in the number of mature spermatozoa.

Function : Hydrolyzes the second messenger cAMP, which is a keyregulator of many important physiological processes.

Subunit : Isoform 1 interacts with LYN. Isoform 2 and isoform 6interact weakly with LYN. Isoform 1, isoform 2 and isoform 6interact with ARRB2.

Subcellular Location : Isoform 1: Cytoplasm, perinuclear region.

Post-translational modifications : Phosphorylation by MAPKAPK2 its activation through PKAphosphorylation (By similarity). Phosphorylated at Ser-686 andSer-688 when expressed in S.frugiperda cells. Isoform 2 and isoform7 are activated by phosphorylation at Ser-119 and Ser-123respectively by PKA.

Proteolytically cleaved by caspase-3.

Similarity : Belongs to the cyclic nucleotide phosphodiesterasefamily. PDE4 subfamily.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P27815.3

抗体的鉴定：

1）磷酸二酯酶4A8抗体说明书 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

Anti-Crk p38 /CI/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠Crk p38抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-NFATc1/FITC 荧光素标记活化T细胞核因子1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh C10orf81 10号染色体开放阅读框81抗体 规格 0.2ml

NOS-3 (eNOS) endotheli cell NOS 合成酶-3(抗原) 0.5mg

HPV18 E6 protein 英文名称： 人类状瘤病毒18 E6抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh RNF156 环指蛋白156抗体 规格 0.2ml

Anti-NFATc1/FITC 荧光素标记活化T细胞核因子1蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-CITED1/ABCC1/FITC 荧光素标记结合转化激活因子CITED1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ty*0) /FITC 荧光素标记磷酸化马铃薯球蛋白(性硬化)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh 5 lipoxygenase/ALOX5 5-脂氧合酶抗体 规格 0.1ml

Mouse Anti-rat IgG/APC APC标记的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml

GRK3 英文名称： β能受体激酶2抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh PSRC1 富含脯氨酸/丝氨酸卷曲螺旋蛋白1抗体 规格 0.2ml

Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ty*0) /FITC 荧光素标记磷酸化马铃薯球蛋白(性硬化)抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Ntn4(Human Netrin-4) ELISA Kit 人轴突生长诱向因子4Multi-class antibodies规格： 48T

Anti-Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) 磷酸化p21激活激酶1/2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HPL/PL 人胎盘泌乳素抗体 规格 0.1ml

HIF-1 Alpha(Mouse hypoxia-inducible factor 1 Alpha)ELISA Kit 小鼠低氧诱导因子1α 96T

Phospho-PKR (Thr451) 英文名称： 磷酸化蛋白激酶R抗体 0.1ml

C19orf75 英文名称： 19号染色体开放阅读框75抗体 0.1ml

Anti-Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) 磷酸化p21激活激酶1/2抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml

CL-0383MDA-MB-436(人癌细胞)5×106cells/瓶×2

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR / CAR 人细胞裂解液 (阳性对照)

人角膜上皮细胞总RNAHCEpiC NA

ZR75-1细胞，人癌细胞 129小鼠ES细胞,D3细胞 WM35, 人细胞

MV3(人细胞) 5×106cells/瓶×2

HUAEC Pellet 人脐动脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 神经细胞培养基NM-prf

CL-0381MDA-MB-175VII(人导管癌细胞)5×106cells/瓶×2

LIPF Others Human 人 Gasic lipase / LIPF 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

人心肌细胞-心室总RNAHCF-av NA

大耳山羊肾细胞;LDG-2 皮下结缔组织细胞，A9细胞 CT26.WT[CT26WT]细胞，小鼠细胞

人胚肺二倍体细胞;KMB-17

HA Others H11N2 甲型 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照)

磷酸二酯酶4A8抗体说明书 PROCR Others Mouse 小鼠 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照)

615小鼠株;Ca763

Calu-1 人细胞

CFPAC-1人*癌细胞 Human pancreatic cancer cell line CFPAC-1 IMDM(GIBCO)+10%FBS

BMP5 Protein Human 重组人 BMP-5 蛋白 (Fc 标签)

人肝星形细胞 (HHSteC)( 5×105 ) COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞 其它