抗体的生物素化标记实验要点：

1. 环指蛋白21抗体说明书 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析；

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件；

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活；

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等；

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性；

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合；

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用；

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

产品订购信息：
英文名称  Anti-RNF21 

中文名称   环指蛋白21抗体说明书 

别    名  IFP1; Interferon Responsive Finger Protein 1; Ring Finger Protein 21; Ring finger protein 21 interferon responsive; RNF21; TRIM 34; TRIM34; Tripartite motif containing protein 34; TRI34_HUMAN.

浓    度   1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源   Rabbit

克隆类型   polyclonal

交叉反应   Human, Mouse, Rat, Pig 

产品类型   一抗  

研究领域    细胞生物 免疫学

蛋白分子量  predicted molecular weight: 57kDa

性    状   Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RNF21 

亚    型   IgG

纯化方法   affinity purified by Protein A

储 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

环指蛋白21抗体说明书 产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

（石蜡切片需做抗原修复） 

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存条件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 

产品介绍 Tripartite motif-containing protein 34 (TRIM34), also known as RING finger protein 21 (RNF21) or interferon-responsive finger protein 1 (IFP1), is a 488 amino acid member of the TRIM family, also known as the RING-B-box coiled-coil (RBCC) family. Members of the RBCC family have an N-terminal RING finger, followed by one or two zinc-binding domains (B-box domains), a leucine coiled-coil region and a variable C-terminal domain. Three isoforms of TRIM34 exist as a result of alternative splicing events. Isoform 1, the most abundant isoform, is highly expressed in placenta, spleen, colon and peripheral blood leukocytes. Studies have shown that Interferon (IFN) stimulation leads to an upregulation of TRIM34. These findings suggest that TRIM34 maybe a downstream effector that mediates IFN activities.

Tissue Specificity : Isoform 1 is the most abundant form. It is highly expressed in the placenta, spleen, colon and peripheral blood leukocytes.

Similarity : Belongs to the TRIM/RBCC family.

Contains 1 B box-type zinc finger.

Contains 1 B30.2/SPRY domain.

Contains 1 RING-type zinc finger.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q9BYJ4.2

抗体的鉴定：

1）环指蛋白21抗体说明书 抗体的效价鉴定：不管是用于诊断还是用于,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。

2）抗体的特异性鉴定：抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。 

如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。

3）抗体亲和力：是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。

Gax(growth arrest-specific homeobox) 生长终止特异性同源盒基因抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

EPHB4 EphB4 兔单抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh Phospho-DARPP32(Thr34) 磷酸化多巴胺/cAMP调节神经磷蛋白抗体 规格 0.1ml

非预染蛋白Marker分子量标准(10-200kDa) 2x250μl/100次 MBI原装

ZNF307 英文名称： 锌指蛋白307抗体 0.2ml

DCTN6 英文名称： 动力蛋白激活蛋白6抗体 0.2ml

EPHB4 EphB4 兔单抗 (PE) Human

FADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡结构域相关蛋白抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

β-酪蛋白(抗体)兔抗山羊、绵羊 Anti-Beta-casein 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Eg5(Tyr92) 磷酸化驱动蛋白样蛋白1抗体 规格 0.1ml

胎血清(特优级) 500ml Hyclone

ZNF263 英文名称： 锌指蛋白263抗体 0.2ml

DYRK2 英文名称： 双特异性酪酸磷酸化调节激酶DYRK2抗体 0.2ml

β-酪蛋白(抗体)兔抗山羊、绵羊 Anti-Beta-casein 0.1ml

ZBTB5 英文名称： 锌指蛋白ZBTB5抗体 0.2ml

Dact2 英文名称： Dapper2蛋白抗体 0.2ml

膜粘连蛋白 Ⅳ抗体 Anti-Annexin Ⅳ 0.1ml

Anti-ZW10 peptide/FITC 荧光素标记着丝粒蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK1+ERK2(Thr185+Tyr187+Thr202+Tyr204) 磷酸化原活化蛋白激酶ERK抗体 规格 0.1ml

DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 结缺失基因抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

CD40LG Protein Human 重组人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 标签)

HCT-15 人结直肠腺癌细胞

LAMP2 Others Mouse 小鼠 LAMP2 / CD107b 人细胞裂解液 (阳性对照)

SK-NEP-1人肾母细胞瘤细胞 SK-NEP-1 human renal cell McCOY's 5A+15%FBS

人胚肾细胞;2V6.11

大鼠脑膜细胞(RMC)(5×105) SP2/0, 小鼠细胞 Mouse

CL-0400NCI-H358(人非小细胞细胞)5×106cells/瓶×2

ALCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 ALCAM / CD166 人细胞裂解液 (阳性对照)

人小脑颗粒细胞RNAHCGC miRNA5 μg

MCF-7/ER36细胞，人癌细胞 小鼠瘤β细胞(NOD/Lt转基因小鼠，SV40巨T抗原),NIT-1细胞 MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞

MKN-28(人高转移细胞) 5×106cells/瓶×2

HUVEC Growth Medium 2pooled Pellet #N/A > 1 mio.cells 前脂肪细胞培养基PAM

环指蛋白21抗体说明书 CD40LG Protein Human 重组人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (His 标签)

HCT-15 人结直肠腺癌细胞

LAMP2 Others Mouse 小鼠 LAMP2 / CD107b 人细胞裂解液 (阳性对照)

SK-NEP-1人肾母细胞瘤细胞 SK-NEP-1 human renal cell McCOY's 5A+15%FBS

人胚肾细胞;2V6.11

大鼠脑膜细胞(RMC)(5×105) SP2/0, 小鼠细胞 Mouse