冷冻保存细胞之方法？
大鼠视网膜色素上皮细胞 RatEye:NormalRetinalPigmentEpithelialCells冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的细胞都是现货供应，详细大鼠视网膜色素上皮细胞 RatEye:NormalRetinalPigmentEpithelialCells说明书！

大鼠视网膜色素上皮细胞 RatEye:NormalRetinalPigmentEpithelialCells

     产品描述：视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。视网膜色素上皮参与视黄醇循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。公司提供的大鼠视网膜色素上皮细胞，采用胰酶消化制备而来。细胞的培养采用公司专利产品大鼠视网膜色素上皮细胞培养试剂盒(RatEyePrimaCell:NormalRetinalPigmentEpithelialCellsCatNo.3-7533)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，大鼠视网膜色素上皮细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于。

【培养指南】
大鼠视网膜色素上皮细胞 RatEye:NormalRetinalPigmentEpithelialCells对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行产品名称冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

ANGPT2 Others Human 人 ANG2 / Angiopoietin-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴邻苯三酚红Bromopyrogallol red质量规格：IND

星形胶质细胞培养基ACM盐酸副品红Basic Fuchsin质量规格：BS,用于生物学染色

CD164 Others Human 人 CD164 / Endolyn 人细胞裂解液 (阳性对照) 灿烂黄Brilliant Yellow质量规格：IND

GPS5 豚鼠皮肤成纤维样细胞刚果红(AR)Congo red质量规格：AR

CM-R123大鼠角膜成纤维细胞完全培养基100mL钙羧酸指示剂(AR)Calconcarboxylic acid质量规格：AR

兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-1吡嗪(>98.0%(GC))Pyrazine质量规格：>98.0%(GC)

小鼠细胞;B16-F1 小鼠关节软骨细胞完全培养基 100mL2,3-吡嗪二羧酸(>98.0%(HPLC)(T))2,3-Pyrazinedicarboxylic Acid质量规格：>98.0%(HPLC)(T)

HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系 Rattus茴香偶酰(>98.0%(GC))p-Anisil质量规格：>98.0%(GC)

ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯偶酰(>99.0%(GC))Benzil质量规格：>99.0%(GC)

人海马趾神经细胞HN-h苯偶酰 (区域精制法精制,熔段数:22)Benzil Zone Refined (number of passes:22)质量规格：

DPEP1 Others Human 人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 糠酸莫米松(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Mometasone furoate

人结膜成纤维细胞HConF纳他霉素,匹马霉素,那他霉素,游霉素质量规格：>90%,BRNatamycin,Pimaricin

ALVA细胞，人细胞 大鼠气管上皮细胞,RTE细胞 大鼠脑膜细胞RMC硫酸铜五水(AR)质量规格：AR,>99%Copper(II) sulfate, pentahydrate

J774A.1(小鼠单核巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2N-乙酰-D-氨基葡萄糖质量规格：>98%,BRN-Acetyl-D-glucosamine

A-375(人恶性细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H123人神经小胶质细胞完全培养基100mL 人胚肺二倍体细胞;KMB-17硫酸锰一水(AR)质量规格：AR,>99%Manganous sulfate monohydrate

大鼠视网膜色素上皮细胞 RatEye:NormalRetinalPigmentEpithelialCellsVCaP(人细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠单核巨噬细胞细胞;RAW 264.7 [RAW264.7苯丙氨酯（标准品）质量规格：含量测定Phenprobamate

人真皮成纤维细胞-胎儿裂解物HDF-f L哈西奈德（标准品）质量规格：含量测定Halcinonide

PRNP Others Human 人 PRNP / Prion 人细胞裂解液 (阳性对照) 氯化胆碱（标准品）质量规格：TLC法检查Choline chloride

人急性T淋巴细胞性细胞;I 2.1(CRL-2572)灵芝酸G(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Ganoderic acid G

tTA基因修饰的小鼠(B类);P19-CAG-tTA-3C8 透明质酸酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL6α-甲基氢化可的松21-醋酸盐质量规格：美国进口6α-Methylprednisolone 21-Acetate

【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。