冷冻保存细胞之方法？
大鼠表皮角质形成细胞 RatSkin:NormalEpidermalKeratinocytes冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的细胞都是现货供应，详细大鼠表皮角质形成细胞 RatSkin:NormalEpidermalKeratinocytes说明书！

大鼠表皮角质形成细胞 RatSkin:NormalEpidermalKeratinocytes

     产品描述：大鼠细胞主要分布于表皮基底层，在上皮程序性死亡后，细胞产生角化并移向表皮。体外培养的细胞容易导致终末分化，不能充分增殖。表皮覆盖皮肤和粘膜表面，作为机体抵抗外界刺激的第一道防御性屏障，具有其他器官不可替代的重要生理功能。角质形成细胞可产生粘附分子和细胞因子，与天然免疫和体内稳态相关。公司提供的大鼠表皮角质形成细胞，采用胰蛋白酶法制备而来。细胞的培养采用公司专利产品大鼠表皮角质形成细胞培养试剂盒(RatSkinPrimaCell:NormalEpidermalKeratinocytesCatNo.3-7547)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，大鼠表皮角质形成细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于。

【培养指南】
大鼠表皮角质形成细胞 RatSkin:NormalEpidermalKeratinocytes对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行产品名称冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

T-CEM细胞，人T细胞细胞 615小鼠瘤株,HP615细胞 MesenFectagen? 间充质干细胞转染试剂盒溴化亚铜(>98%,BR)Copper(I) bromide质量规格：>98%,BR

NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2无水乙酸铜(>99%,BR)Copper(II) acetate质量规格：>99%,BR

Ca Ski(人上皮细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0014A-375(人恶性细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠血细胞;WEHI-3 [WEHI3]溴化铜(>99%,BR)Copper(II) bromide质量规格：>99%,BR

新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF柠檬酸铜(>98.5%,BR)Copper(II) citrate, hydrate质量规格：>98.5%,BR

10. 尿道细胞系统氢氧化铜(>96.5%,Tech Grade)Copper(II) hydroxide质量规格：>96.5%,工业级

人海马趾神经细胞cDNAHN-h cDNA吡罗昔康-d3Piroxicam-d3质量规格：美国进口

PRKAR1A Others Human 人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 泊沙康唑-d4Posaconazole-d4质量规格：美国进口

T739小鼠肺腺株;LA795利福昔明标记d6Rifaximin - Labeled d6质量规格：美国进口

HCCC-9810细胞，人亚力山大细胞 人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株,7WCY1.0细胞 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2罗匹尼罗N-氧化物Ropinirole N-Oxide质量规格：美国进口

Lec1(仓鼠卵巢细胞) 5×106cells/瓶×23-氧罗匹尼罗盐酸盐3-Oxo Ropinirole Hydrochloride质量规格：美国进口

ICAM3 Others Human 人 CD50 / ICAM3 人细胞裂解液 (阳性对照) DON毒素，毒素；脱氧雪腐镰刀菌烯醇(>98%(HPLC),BR)质量规格：>98%(HPLC),BRDeoxynivalenol

CM-R013大鼠肺大内皮细胞完全培养基100mL第威德合金质量规格：工业级Devarda's alloy

UNC5B Others Rat 大鼠 UNC5B / UNC5H2 人细胞裂解液 (阳性对照) 噻奈普汀钠盐质量规格：>98%,BRTianeptine sodium salt

人视网膜内皮细胞HRECD-谷氨酰胺质量规格：0.98D-Glutamine

7F2细胞，小鼠杂交瘤细胞 人细胞,QBC939细胞 大鼠海马神经元RN-h扎托布洛芬质量规格：>98%Zaltoprofen

大鼠表皮角质形成细胞 RatSkin:NormalEpidermalKeratinocytesCL-0418QGY-7703(人细胞)5×106cells/瓶×2N7-(2-氨基甲酰-2-羟乙基)鸟嘌呤质量规格：美国进口N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine

小鼠成纤维细胞(EGFP标记)2-氨基-6,8-二羟基嘌呤盐酸盐质量规格：美国进口2-Amino-6,8-dihydroxypurine Hydrochloride

人男性正常细胞;Hs68 人粘膜上皮细胞完全培养基 100mL全反式甲酯视黄酸质量规格：美国进口all-trans Retinoic Acid Methyl Ester

人真皮成纤维细胞-裂解物HDF-a L13-顺式-甲酯视黄酸质量规格：美国进口13-cis Retinoic Acid Methyl Ester

SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-FAM ；6-羧基荧光素质量规格：0.956-Carboxyfluorescein

【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。