冷冻保存细胞之方法？
大鼠内脏脂肪细胞 RatFat:NormalVisceralFatCells冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的细胞都是现货供应，详细大鼠内脏脂肪细胞 RatFat:NormalVisceralFatCells说明书！

大鼠内脏脂肪细胞 RatFat:NormalVisceralFatCells

     产品描述：大鼠内脏脂肪细胞主要存在于结缔组织中，能够合成和贮存脂肪。成熟的脂肪细胞呈圆形，胞浆内富含脂滴。脂肪细胞在脂类代谢，能量平衡以及抵等方面起重要作用，与，、、乳癌等多种生理疾病密切相关。公司提供的大鼠内脏脂肪细胞，采用组织块培养法制备而来。细胞的培养采用公司专利产品大鼠内脏脂肪细胞培养试剂盒(RatFatPrimaCell:NormalVisceralFatCellsCatNo.3-7568)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，大鼠内脏脂肪细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于。
 

【培养指南】
大鼠内脏脂肪细胞 RatFat:NormalVisceralFatCells对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行产品名称冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

微内皮细胞cDNAHCMEC cDNA溴化胆固醇,从牛脂来(>98.0%(T))Cholesteryl Bromide from Beef Fat质量规格：>98.0%(T)

SLPI Others Human 人 SLPI 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 胆固醇壬酸酯(>89.0%(GC))Cholesterol Pelargonate质量规格：>89.0%(GC)

大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6胆固醇壬基碳酸酯Cholesterol Nonyl Carbonate质量规格：

95-D细胞，高转移细胞 人细胞,M2e细胞 正常大鼠肾细胞;NRK胆固醇庚基碳酸酯Cholesterol Heptyl Carbonate质量规格：

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A2胆固醇油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))Cholesterol Oleyl Carbonate质量规格：>70.0%(HPLC)

NCI-H1650细胞，人细胞 小鼠细胞,RM-1细胞 CM-R031大鼠肠动脉内皮细胞完全培养基100mL比卡鲁胺（标准品）Bicalutamide质量规格：HPLC>98%,标准品

Raji(人Butt's细胞) 5×106cells/瓶×2白消安Busulfan/Myleran质量规格：>98.5%,USP,可用于细胞培养

Promocell C-28050 DC Generation Medium, 树突状细胞生成培养基(即用型) 250ml白消安（标准品）Busulfan/Myleran质量规格：HPLC>98%,标准品

人骨髓间充质干细胞(hMSCs)洛莫司汀Lomustine质量规格：>98%,BR

TNFRSF12A Others Human 人 TNFRSF12A / FN14 / TWEAKR 人细胞裂解液 (阳性对照) 洛莫司汀（标准品）Lomustine质量规格：HPLC>98%,标准品

人成纤维细胞-心室HCF-av奈拉滨质量规格：>99.0%,细胞培养级Nelarabine

gpc-1细胞，人细胞 兔眼Tenon's囊成纤维细胞,RYTF细胞 大鼠背脊髓神经元RN-dsc醋酸奈西立肽质量规格：>95%Nesiritide Acetate

K7M2 wt(小鼠成骨细胞) 5×106cells/瓶×2硫酸镁七水(分子生物学级)质量规格：>98%,分子生物Magnesium sulfate, heptahydrate

A-431(人表皮癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H131人角膜成纤维细胞完全培养基100mL 人羊膜细胞;HA糖化酶;葡萄糖淀粉酶质量规格：BR,10万u/GGlucozyme

CM-R007大鼠上皮细胞完全培养基100mL聚乙二醇4000质量规格：>99%,BRPEG 4000

大鼠内脏脂肪细胞 RatFat:NormalVisceralFatCells人真皮成纤维母细胞-HDF-a2'-(二苄氨基)-6'-(二乙氨基)荧烷(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)2'-(Dibenzylamino)-6'-(diethylamino)fluoran

CGB5 Others Human 人 CGB5 人细胞裂解液 (阳性对照) 3',6'-二甲氧基荧烷(>98.0%(HPLC))质量规格：>98.0%(HPLC)3',6'-Dimethoxyfluoran

家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC1,1'-亚甲基二-2-萘酚(>97.0%(GC))质量规格：>97.0%(GC)1,1'-Methylenedi-2-naphthol

二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr- 细胞，TE-11细胞 B82细胞，鼠细胞系2-萘基苄基醚(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)Benzyl 2-Naphthyl Ether

B16-F10, 小鼠高转移细胞 Mouse5-溴吲哚 质量规格：>99%5-Bromoindole

【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。