冷冻保存细胞之方法？
人组织源细胞 HumanCancer:BreastCancerTissuesCells冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
本公司提供的细胞都是现货供应，详细人组织源细胞 HumanCancer:BreastCancerTissuesCells说明书！

人组织源细胞 HumanCancer:BreastCancerTissuesCells

     产品描述：是发生于甲状腺的癌病类疾病，由数种不同生物学行为以及不同病理类型的癌肿组成，主要包括乳头状腺癌、滤泡状癌、未分化癌、髓样癌四种类型。细胞呈上皮样，贴壁生长，具有无限增殖能力，丧失接触抑制现象，癌细胞间粘着性减弱。此外，易于被凝集素凝集，细胞骨架结构发生紊乱。公司提供的人组织源细胞均来自新鲜组织，用于培养成人组织源细胞的组织采集于地方医院，组织的采集根据公司批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人组织源细胞培养试剂盒(HumanCancerPrimaCell:BreastCancerTissuesCellsCatNo.3-0673)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，人组织源细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和。
      发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。科技提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
      保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于。

【培养指南】
人组织源细胞 HumanCancer:BreastCancerTissuesCells对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行产品名称冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

大鼠肾系膜细胞完全培养基 100mL升麻素（标准品）Cimifugin质量规格：HPLC≥98%，标准品

L6大鼠成肌细胞 L6 rat skeletal myoblasts DMEM培养基+10%FBS升麻素苷（标准品）Prim-O-glucosylcimifugin质量规格：HPLC≥98%，标准品

IGFBP3 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 标签)升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷（标准品）Cimigenol-3-O-α-L-arabinoside质量规格：HPLC≥98%，标准品

G-401(人Wilms细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠脑膜细胞MMenC圣草次苷（标准品）Eriocitrin质量规格：HPLC≥98%，标准品

小型猪肾细胞;MPK圣草酚(标准品）Eriodictyol质量规格：HPLC≥98%，标准品

AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯甲醛（标准品）Benzaldehyde质量规格：含量测定

人骨骼肌成肌细胞总RNAHSkMM NA卡维丁（标准品）Cavidine质量规格：含量测定

HSPA1A Others Human 人 HSP70 / HSPA1A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 5-羟色胺盐酸盐（标准品）Serotonin hydrochloride 质量规格：含量测定

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A月见草油（标准品）Evening primrose oil质量规格：鉴别

NCI-H446[H446]细胞，小细胞细胞 人癌细胞系,ZR-75-30细胞 615小鼠T细胞性瘤株;L7712龙血素A（标准品）Loureirin A 质量规格：含量测定

山羊皮肤成纤维样细胞;DG-S1扑灭津(标准品)质量规格：分析标准品Propazine

RBP4 Others Human 人 RBP4 人细胞裂解液 (阳性对照) 戊炔草胺(标准品)质量规格：分析标准品Propyzamide

CM-M117小鼠视网膜muller细胞完全培养基100mL尼可地尔质量规格：>98.5(C8H9N3O4干品),BR,可用于细胞培养Nicorandil

ACPP Others Mouse 小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 人细胞裂解液 (阳性对照) 尼可地尔（标准品）质量规格：HPLC法含量测定Nicorandil

小鼠肾系膜细胞完全培养基 100mL烟酸质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养 Nicotinic acid

人组织源细胞 HumanCancer:BreastCancerTissuesCellsCM-R070大鼠尿道上皮细胞完全培养基100mL甲氨蝶呤二甲基酯质量规格：美国进口Methotrexate Dimethyl Ester

ACHN, 人肾细胞腺癌细胞 胚肺细胞,HLF细胞 Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人细胞)甲氨蝶呤-甲基-d3，二甲基酯质量规格：美国进口Methotrexate-methyl-d3, Dimethyl Ester

小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞;SH27-羟基甲氨蝶呤质量规格：美国进口7-Hydroxy Methotrexate

RTN4R Others Mouse 小鼠 RTN4R / NOGOR 人细胞裂解液 (阳性对照) 8-羟基甲氨蝶呤-d3质量规格：美国进口7-Hydroxy Methotrexate-d3

人*癌细胞;PANC-15'-O-三苯甲基胸苷质量规格：>98%,BRTrt-dT

【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。