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产地 | 进口、国产 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 莼试 |
货号 | CS-E11345 |
用途 | 仅用于科研 |
检测方法 | 详见说明书 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
适应物种 | 详见说明书 |
检测限 | 5pg/mL~160pg/mL |
数量 | 50 |
包装规格 | 详见说明书 |
标记物 | 详见说明书 |
纯度 | 98% |
样本 | HLA-A |
应用 | 详见说明书 |
是否进口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa试剂盒。
产品名称 | 英文名称 | 检测范围 |
人类白细胞抗原AELISA试剂盒 | HLA-A | 5pg/mL~160pg/mL |
自备物品:
酶标仪(450nm)
高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒温箱
自备的设备及试剂:
1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2. 单道或多道微量加液器及吸头
3. 稀释样品的EP管
4. 蒸馏水或去离子水
5. 吸水纸
6. 盛放洗液的容器
试剂盒性能:
人类白细胞抗原AELISA试剂盒 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
灵敏度:*检测浓度小于0.1 pg/mL。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6个月
双抗体夹心法(检测未知抗原) | 间接法(检测未知抗体) |
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 | 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) 3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标*抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,*一遍用DDW洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 |
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
RWPE-2(人正常细胞) 5×106cells/瓶×2法莫替丁相关化合物BFamotidine Related Compound B质量规格:美国进口
HBZY-1(大鼠肾小球系膜细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠细胞)5×106cells/瓶×2 SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1非那西丁-乙氧基-2-13CPhenacetin-ethoxy-2-13C质量规格:美国进口
人尿道上皮细胞RNAHUC miRNA5 μg非那西丁-乙氧基-1-13CPhenacetin-ethoxy-1-13C质量规格:美国进口
FLT3LG Others Mouse 小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 人细胞裂解液 (阳性对照) 氟西汀Fluoxetine质量规格:美国进口
人主动脉内皮细胞完全培养基 100mL元盐酸氟西汀Meta Fluoxetine 质量规格:美国进口
TNFSF10 Protein Mouse 重组小鼠 TNFSF10 / AIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 标签)双嘧达莫质量规格:>98%,USPDipyridamole
人肝间充质干细胞(肝)(HMSC-HE)(5×105) HGC-27人细胞 Human他米巴罗汀质量规格:≥99.0%Tamibarotene
EB病毒转化的人B细胞;KM9402分子筛3A(干燥剂用)质量规格:干燥剂用Molecular sieves, 3 ?
人齿根膜韧带成纤维细胞(HPDLF)( 5×105 )分子筛3A(pellets,3-5 mm)质量规格:pellets,3-5 mmMolecular sieves, 3 ?
CL-0406NCI-H838(人非小细胞细胞)5×106cells/瓶×2分子筛3A(pellets,2-3 mm)质量规格:pellets,2-3 mmMolecular sieves, 3 ?
CD22 Others Mouse 小鼠 Siglec-2 / CD22 人细胞裂解液 (阳性对照) 五氟苄溴(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Pentafluorobenzyl Bromide
人脑膜细胞RNAHMC miRNA5 μgO-(2,3,4,5,6-五氟苄基)羟胺盐酸盐(>98.0%(HPLC)(N))质量规格:>98.0%(HPLC)(N)O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine
家兔肾细胞;RABK3 细胞,COLO 205细胞 U14-GFP细胞,绿色荧光蛋白标记小鼠子细胞壬烷(>99.5%(GC),标准物)质量规格:>99.5%(GC),标准物质Nonane
人肺转化细胞;AE1201N-乙酰甘氨酸质量规格:>98%N-Acetylglycine
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Solomon Islands/3/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) N-乙酰-L-丙氨酸质量规格:98%,BRAc-Ala-OH
人类白细胞抗原AELISA试剂盒狗肾细胞隆突型;MDCK superdome3-甲基-d3-腺嘌呤质量规格:美国进口3-Methyl-d3-adenine
中国仓鼠卵巢细胞;CHO 癌细胞,ZR-75-30细胞 SVP细胞,VERO衍生株N1-氧基-腺嘌呤质量规格:美国进口Adenine-N1-Oxide
人胚肾细胞;293 [HEK-293]9-(2-羟丙基-d6)腺嘌呤质量规格:美国进口9-[2-(Hydroxypropyl-d6] Adenine
HA Others H6N1 甲型 H6N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) (R)-9-(2-羟丙基)腺嘌呤质量规格:美国进口(R)-9-[2-(Hydroxypropyl] Adenine
人星形胶质细胞HA3-1酸甘油酸激酶质量规格:1000u/mg,Sigma分装3-Phosphoglyceric Phosphokinase
操作流程如下:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。