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公司实验室

抗生素检定培养基6号
(AntibioticAgarNo.6)

用途：

抗生素检定培养基6号用于黏菌素等效价及残留的微生物学检定(中华人民共和国药典2010版)。

原理：

本法是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，抑菌圈直径与抗生素的浓度或活性有关;比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种微生物学方法。

配方(每升)：

胨8g

牛肉浸出粉3g

氯化钠45g

磷酸氢二钾3.3g

葡萄糖2.5g

酵母浸出粉5g

磷酸二氢钾1g

琼脂 15g

最终pH 7.3±0.1

使用方法(计数用法)：

1、称取抗生素检定培养基6号82.8g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌30min。

2、双碟的制备应在无菌室或洁净室内进行，并注意避免微生物及抗生素污染。培养基应在水浴中或微波炉内融化，避免直火加热。

3、双碟的底层：用灭菌大口20mL吸管或其它灭菌分装器，吸取已融化的培养基20mL注入双碟内，待凝固后加入菌层。(双碟内的培养基应均匀的分布于平皿内。)

抗生素检定培养基6号按成分可为三大培养基分类：
1) 合成培养基：
各种成分完全是已知遥各种化学物质 组成成分精确 重复性强。
2) 天然培养基：
由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定 但配制方便 营养丰富培养效果好 常常被采用。
3) 半合成培养基：
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类 或在合成培育基的基础上添加某些天然成分 更能有次的满足微生物对营养的需要。
实验方法：
1.培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件：
   无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
   MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
   控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
   倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
   倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
中国仓鼠肺细胞;V79知母皂苷BII（标准品）Timosaponin BII质量规格：HPLC≥98%，标准品

H1299细胞，人 SV40转化的非洲绿猴肾细胞,COS-7细胞 CM-M058小鼠膀胱上皮细胞完全培养基100mL2',3'-二脱氧鸟苷(ddG)2',3'-Dideoxyguanosine质量规格：>97%,进分

SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2知母皂苷E(标准品)Anemarsaponin E质量规格：HPLC≥98%，标准品

NHEK-c 正常人表皮角质形成细胞(NHEK)，混合 500,000cells 原代心肌细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml植酸(标准品)Phytic acid质量规格：UV≥98%，标准品

猪源细胞重楼皂苷I（标准品）Polyphyllin I质量规格：HPLC≥98%，标准品
杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2F8低粘度羟丙基纤维素HPC, hydroxypropyl cellulose质量规格：150~400 mpa.s,BR

Bel-7404细胞，人细胞 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞 中国仓鼠卵巢细胞;CHOL(+)1酸二钠二水(>98%,BC )L(+)Sodium tartrate dihydrate质量规格：>98%,BC

L1210(小鼠细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸吡哆胺(>98%,BC )Pyridoxamine, dihydrochloride质量规格：>98%,BC

Promocell C-28012 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Differe. Medium, 间充质干细胞软骨分化培养基(即用型) 100ml水杨酸钠(>99%,USP)Sodium salicylate质量规格：>99%,USP

人淋巴成纤维细胞总RNAHLF NA3-(环己氨基 )-1-丙磺酸钠(分子生物学级)CAPS, sodium salt质量规格：>99%,分子生物学级
中国仓鼠卵巢细胞;CHO辅酶Q9质量规格：>99%CoenzymeQ9

F3 Others Human 人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人细胞裂解液 (阳性对照) 辅酶Q9(标准品)质量规格：>99%,标准品CoenzymeQ9

A172 人胶质母细胞瘤细胞利可君（标准品）质量规格：含量测定Leucoson

MCF-7-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)人癌细胞 MCF-7-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human breast cancer cells 1640+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin拉米夫定（标准品）质量规格：含量测定Lamivudine

RSPO1 Protein Human 重组人 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白托拉塞米（标准品）质量规格：HPLC法含量测定Torasemide 
抗生素检定培养基6号培养基制备的标准操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，放入一定量的培养基干粉，轻轻搅拌以促进溶解；
↓高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH值；
↓液体培养基一般要在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。
↓质量检查
    →将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格。
    →按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。
↓液体培养基及琼脂平板须在40℃的条件下保存，保质期一般为一周，如用塑料袋密封，则至多可以保存2周的时间。