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公司实验室

改良Y培养基
ModifiedYersinaMedium

用途：

改良Y培养基用于小肠耶尔森氏菌的选择性分离和培养。(GB/T4789.8-2008)

原理：

蛋白胨和水解酪蛋白提供氮源和微量元素;乳糖用于糖发酵试验;氯化钠维持正常的渗透压，去氧胆酸钠和三号胆盐抑制革兰氏阳性菌;丙酮酸钠刺激目标菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂。

培养基配方(每升)：

蛋白胨15.0g

水解酪蛋白5.0g

氯化钠5.0g

乳糖10.0g

草酸钠2.0g

去氧胆酸钠6.0g

三号胆盐5.0g

丙酮酸钠 2.0g

孟加拉红 40mg

琼脂 17.0g

最终pH7.4±0.2

使用方法：

1、称取改良Y培养基67g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟。

2、待培养基冷至50-55℃左右，倾注灭菌平板。

3、将增菌后的改良磷酸盐缓冲液划线接种于改良Y培养基上，26℃培养48h.

4、挑取培养基上无色透明、不粘稠的菌落，做进一步的鉴定。

改良Y培养基图片按成分可为三大培养基分类：
1) 合成培养基：
各种成分完全是已知遥各种化学物质 组成成分精确 重复性强。
2) 天然培养基：
由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定 但配制方便 营养丰富培养效果好 常常被采用。
3) 半合成培养基：
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类 或在合成培育基的基础上添加某些天然成分 更能有次的满足微生物对营养的需要。
实验方法：
1.培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件：
   无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
   MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
   控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
   倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
   倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人细胞裂解液 (阳性对照) 吲哚布芬（标准品）Indobufen质量规格：含量测定

人淋巴内皮细胞完全培养基 100mL盐酸曲普利啶（标准品）Triprolidine hydrochloride质量规格：含量测定

HS-1细胞，人细胞系 滑念珠菌 小鼠*癌细胞(B类);Pan02米力农(标准品)Milrinone质量规格：>98%,标准品

CCL20 Protein Human 重组人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 标签)壬二酸（标准品）Azelaic acid质量规格：检查

MDCK(犬肾细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CRELD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 培哚普利杂质S9780（培哚普利拉）（标准品）Perindoprilat质量规格：供HPLC法系统适用性试验用
AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸恩夫韦地 Enfuvirtide Acetate质量规格：BR,>98%

小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albinoD-海藻糖无水D-(+)-Trehalose Anhydrous质量规格：≥99%,BR

tTA基因修饰的小鼠(B类);P19-CAG-tTA-1F3 弹性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL二醋酸戈那瑞林(LH-RH)Gonadorelin Acetate质量规格：>98%,二醋酸盐

A549, 人细胞系 Human醋酸戈舍瑞林 Goserelin Acetate质量规格：BR,>98%

NETO1 Others Human 人 NETO1 / BTCL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸亮丙瑞林 Leuprolide Acetate质量规格：BR,>98%
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-215- 羧基荧光素二乙酸酯；5-CFDA质量规格：0.955-Carboxyfluorescein diacetate

CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 5(6)-羧基荧光素二乙酸酯质量规格：0.95(6)-Carboxyfluorescein diacetate

骨骼肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)5-氨基荧光素质量规格：>95%5-Aminofluorescein

人间充质干细胞-肝 人肌肉成纤维细胞瘤，C2C12细胞 B16(色素瘤细胞)6-氨基荧光素质量规格：0.956-Aminofluorescein

人小细胞细胞;NCI-H446氯羟喹（标准品）质量规格：HPLC含量测定Clioquinol 
改良Y培养基图片培养基制备的标准操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，放入一定量的培养基干粉，轻轻搅拌以促进溶解；
↓高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH值；
↓液体培养基一般要在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。
↓质量检查
    →将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格。
    →按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。
↓液体培养基及琼脂平板须在40℃的条件下保存，保质期一般为一周，如用塑料袋密封，则至多可以保存2周的时间。