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公司实验室

改良磷酸盐缓冲液
(ModifiedPhosphateBuffer)

用途：

改良磷酸盐缓冲液用于小肠耶尔森氏菌的增菌培养。(GB/T4789.8-2008，ISO标准)

原理：

山梨醇提供碳氮源，磷酸氢二钠和磷酸二氢钠为缓冲液，胆盐抑制革兰氏阳性菌，氯化钠提供细胞所需要的渗透压。

培养基配方(L)

磷酸氢二钠8.23g

磷酸二氢钠1.2g

氯化钠5.0g

3号胆盐1.5g

山梨醇20g

最终pH7.6

使用方法

称取改良磷酸盐缓冲液36g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃灭菌15min，备用。

改良磷酸盐缓冲液按成分可为三大培养基分类：
1) 合成培养基：
各种成分完全是已知遥各种化学物质 组成成分精确 重复性强。
2) 天然培养基：
由天然物质制成 这类培养基的化学成份不恒定 但配制方便 营养丰富培养效果好 常常被采用。
3) 半合成培养基：
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类 或在合成培育基的基础上添加某些天然成分 更能有次的满足微生物对营养的需要。
实验方法：
1.培养基阳性组：取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中，每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中，用于计数，每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组：即空白对照，即不添加菌液。
3. 接种量计数：步骤1中的平皿中，细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基，霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件：
   无菌检查：20～25℃培养14天或直至出现浑浊（不超过14天）
   MPN计数：30～35℃培养箱中培养3天
   控制菌检查：30～35℃培养箱中培养18～24小时
   倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30～35℃培养箱中培养3天
   倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20～25℃培养箱中培养3～5天
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA异绿原酸C(标准品)Isochlorogenic acid C质量规格：HPLC≥98%，标准品

13. *细胞系统异牡荆素(标准品)Isovitexin质量规格：HPLC≥98%，标准品

CL-0075DU 145(人细胞)5×106cells/瓶×2异欧前胡素（标准品）Isoimperatorin质量规格：HPLC≥98%，标准品

小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1 大鼠脉络膜细胞完全培养基 100mL异嗪皮啶(标准品)Isofraxidin质量规格：HPLC≥98%，标准品

A549/ Taxol 人紫杉醇耐药株异去氢钩藤碱（标准品）Isocorynoxeine质量规格：HPLC≥98%，标准品
人间充质干细胞-脂肪赤藓红;赤藓红B钠盐Erythrosin B sodium salt质量规格：BS

AKT1 Others Human 人 AKT1 / PKB / PKBα 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 达拉菲尼,达帕菲尼Dabrafenib,GSK2118436A质量规格：>98%,BRAFV600特异性抑制剂

人角膜细胞RNAHK miRNA5 μg乙酰柠檬酸三丁酯Acetyl tributyl citrate质量规格：>97%

7721细胞，7721细胞 人细胞(淋巴结转移),NCI-H292细胞 人间充质干细胞-脂肪乙酰柠檬酸三乙酯Triethyl acetyl citrate 质量规格：>99%

仓鼠皮肤细胞;GH-S1海藻酸Alginic acid质量规格：CP
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B2老鹳草素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Geraniin

人角膜成纤维细胞 (HcorF)( 5×105 )酪醇(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Tyrosol

CM-M067小鼠肾足突细胞完全培养基100mL雷酚内酯（标准品）质量规格：HPLC≥99%，标准品Triptophenolide

小鼠成肌细胞;C2C12 小鼠胰岛细胞完全培养基 100mL雷公藤红素(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Celastrol

人间充质干细胞-肝 Human拉西地平（标准品）质量规格：含量测定Lacidipine 
改良磷酸盐缓冲液培养基制备的标准操作：
↓在玻璃容器中加入所需蒸馏水的二分之一量，放入一定量的培养基干粉，轻轻搅拌以促进溶解；
↓高压灭菌前可用pH计或精密pH试纸校正培养基的pH值；
↓液体培养基一般要在灭菌前分装，分装时应注意每管的分装量不应高于试管的2/3。琼脂平板是在培养基高压灭菌后冷至50-600C时再倾注平板。
↓质量检查
    →将制好的培养基在350C孵育过夜，判定是否灭菌合格。
    →按不同的培养要求，接种相应的菌种，观察细菌的发育、菌落形态、色素、溶血等特征，判断培养基是否符合要求。
↓液体培养基及琼脂平板须在40℃的条件下保存，保质期一般为一周，如用塑料袋密封，则至多可以保存2周的时间。