![]() |
产地 | 进口、国产 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 莼试 |
货号 | CS-E11017 |
用途 | 仅用于科研 |
检测方法 | 详见说明书 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
适应物种 | 详见说明书 |
检测限 | 75pg/mL~2400pg/mL |
数量 | 50 |
包装规格 | 详见说明书 |
标记物 | 详见说明书 |
纯度 | 98% |
样本 | Nesfatin-1 |
应用 | 详见说明书 |
是否进口 | 是 |
公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa试剂盒。
产品名称 | 英文名称 | 检测范围 |
人新饱食分子蛋白1ELISA试剂盒 | Nesfatin-1 | 75pg/mL~2400pg/mL |
自备物品:
酶标仪(450nm)
高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒温箱
自备的设备及试剂:
1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2. 单道或多道微量加液器及吸头
3. 稀释样品的EP管
4. 蒸馏水或去离子水
5. 吸水纸
6. 盛放洗液的容器
试剂盒性能:
人新饱食分子蛋白1ELISA试剂盒 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
灵敏度:*检测浓度小于0.1 pg/mL。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6个月
双抗体夹心法(检测未知抗原) | 间接法(检测未知抗体) |
1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 | 1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。 2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照) 3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标*抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,*一遍用DDW洗涤。 4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml 6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 |
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
小鼠单核巨噬细胞;J774A.1氯化锶六水Strontium chloride, hexhydrate质量规格:AR,≥99%
tTA基因修饰的小鼠(B类);F9-CAG-tTA-1A3 IV型胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL硫酸钙二水Calcium sulfate, dihydrate质量规格:>99%,AR
AGS人胃腺癌细胞 Human2'-脱氧胞苷'-5'-1酸(dCMP)dCMP, 2'-Deoxycytidine 5'-monophosphate, free acid质量规格:>98%,分子生物学级
TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人细胞裂解液 (阳性对照) DSS(分子生物学级)DSS质量规格:分子生物学级
人成纤维细胞-心房HCF-aa腺苷脱氨酶(15U/mg)Adenosine deaminase from calf spleen 15U/mg质量规格:15U/mg,进口
大鼠骨髓基质细胞完全培养基 100mL丙硫异烟胺质量规格:>98.5%,BRProthionamide
BV-2小鼠小胶质细胞 Microglial cells of BV-2 mice 1640+20%FBS丙硫异烟胺(标准品)质量规格:>98%,标准品Prothionamide
EREG Protein Human 重组人 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 标签)硬脂酸甲酯(>99.5%(GC),标准物质)质量规格:>99.5%(GC),标准物质Methyl Stearate
VE(人内皮细胞) 5×106cells/瓶×2 胰岛β细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)亚麻酸甲酯(>98.0%(GC),标准物质)质量规格:>98.0%(GC),标准物质Methyl Linolenate
大鼠嗜碱性粒细胞性细胞;RBL-2H3亚油酸甲酯(>99.0%(GC),标准物质)质量规格:>99.0%(GC),标准物质Methyl Linoleate
HT-3细胞,人子细胞 人肾小球髓母细胞,HBZY-1细胞 软骨细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)辛二酸(>质量规格:>98%,BROctanedioic acid
兔肾细胞;RK-13橄榄油质量规格:商品级Olive oil
SOST Others Human 人 SOST / Sclerostin 人细胞裂解液 (阳性对照) 邻甲氧基肉桂醛(>质量规格:>98%,BRo-Methoxycinnamaldehyde
CL-0103Hep G2(人细胞)5×106cells/瓶×2苔红素(合成)质量规格:BSOrcein, synthetic
IgG2a Others Mouse 小鼠 IgG2a-Fc 人细胞裂解液 (阳性对照) 蔗糖1酸化酶质量规格:BC GradeSucrose phosphorylase from L. Mesenteroides
人新饱食分子蛋白1ELISA试剂盒HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞 HumanAmmoniumferrilbrown枸橼酸铁250毫克AR,98%
EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照) 4- 4-Methoxyacetophenone,99% 100-06-1 10G 通用试剂
人前脂肪细胞-内脏总RNAHPA-v NA肖醋胍(*)¤ Gucnidinq nitnctq 206-93-4
IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人细胞裂解液 (阳性对照) FastblueBBsalt坚牢蓝BB盐1公斤高,98%
豹猫肺成纤维样细胞;LCL24602-84-0法尼醇FARNESOL
操作流程如下:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。