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人外周血单核细胞培养
  • 品牌:莼试
  • 产地:进口、国产
  • 货号:CSX3302
  • 发布日期: 2020-06-02
  • 更新日期: 2024-05-24
产品详请
产地 进口、国产
保存条件 Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8% Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
品牌 莼试
货号 CSX3302
组织来源 详见说明书
是否是肿瘤细胞
规格 详见说明书
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 详见说明书
品系 详见说明书
用途范围 公司产品仅用于科研
生长状态 悬浮生长
物种来源 详见说明书
纯度 详见说明书%
是否进口

细胞培养过程:



冷冻保存细胞之方法:
人外周血单核细胞培养冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 30~60 分钟-20 30 分钟* → -80 16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

资源名称 人外周血单核细胞培养
种属:PBMC

类型:悬浮生长

分离基物:人,外周血单核细胞

模式菌株:未知

培养方法

培养基:164090%FBS10%;双抗

生长条件:Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

存储条件:Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8% Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase

细胞分类:
第一种:
是冻存产品,由氮直液接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)
质量保证:我们的细胞株来源于ATCCECACCDSMZJCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤:

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1
)准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)85%;北美胎牛血清(United StatesGIBCO,货号16000-044)15%
2
)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%
3
)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1
)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.
2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按1215的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

收到人外周血单核细胞培养处理方法
1
、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2
、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3
、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4
、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5
、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6
、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是人外周血单核细胞培养的相关热销产品:
CM-R002大鼠肺平滑肌细胞完全培养基100mL丙磺舒(标准品)Probenecid质量规格:>98%,标准品

NCI-N87细胞,人胃腺癌细胞 人跟细胞,Hp2/o细胞 草鱼肾细胞;GIK诺氟沙星Norfloxacin质量规格:>99,USP,BR,可用于细胞培养

DH82(犬巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2诺氟沙星(标准品)Norfloxacin质量规格:HPLC>98%,标准品

CA9 Others Human CAIX / CA9 人细胞裂解液 (阳性对照) 诺氟沙星盐酸盐Norfloxacin HCl质量规格:含量大于98.5%

人滑膜细胞总RNAHS NA诺氟沙星盐酸盐(标准品)Norfloxacin HCl质量规格:HPLC>98%,标准品
小鼠膀胱成纤维细胞完全培养基 100mL蔗糖质量规格:分子生物学级Sucrose

AtT-20小鼠细胞 AtT-20 mouse pituitary tumor cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSD-海藻糖二水质量规格:≥98%,BRD-(+)-Trehalose, dihydrate

IL12B Protein Mouse 重组小鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 标签)亮绿SF(淡黄)质量规格:BSLight Green SF Yellowish

U-118 MG(人脑星形胶质母细胞瘤) 5×106cells/瓶×2 SK-OV-3 [SKOV-3](人细胞)健那绿B质量规格:BSJanus Green B

CM-M012小鼠肺动脉成纤维细胞完全培养基100mL酸性绿3质量规格:BS,进口原装Guinea Green B
A9细胞,皮下结缔组织细胞 人肝星形细胞正常,LX-2细胞 CL-0088H4-IIE(大鼠细胞 )5×106cells/瓶×25-尿苷质量规格:>99%,BR5-Iodo-Uridine

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-215--2'-脱氧尿苷()质量规格:>98%,BR5-Iodo-deoxyuridine

FCN1 Others Human Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 人细胞裂解液 (阳性对照) 5--2'-脱氧胞苷质量规格:>98%,BR5-Iodo-deoxycytidine

神经元细胞Many types of cells包装:5 ×105(1ml)2'-甲氧基尿苷质量规格:>98%,BR2-OMe Uridine

NA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) TES. Na;2-[((羟甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸钠质量规格:>99%,ARTES
人外周血单核细胞培养中国仓鼠卵巢细胞(亚系*);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)乙二醇双[4-(乙氧羰基)苯基](>98.0%(GC))Ethylene Glycol Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether质量规格:>98.0%(GC)

FRhK-4细胞,恒河猴胚肾细胞 人胚胎*组织来源细胞,CCC-HPE-2细胞 CM-M064小鼠上皮细胞完全培养基100mL乙二醇双(4-羧苯基)(>95.0%(T))Ethylene Glycol Bis(4-carboxyphenyl) Ether质量规格:>95.0%(T)

大鼠癌细胞;MADB1069,9-[4-(2-羟乙氧基)苯基](>98.0%(GC))9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene质量规格:>98.0%(GC)

IL1RAP Others Human IL1R3 人细胞裂解液 (阳性对照) pre-ELM-11(>98.0%(T))pre-ELM-11质量规格:>98.0%(T)

脂肪细胞生长添加物PAGS苯均四酸(>98.0%(T))Pyromellitic Acid质量规格:>98.0%(T)