细胞培养过程：

冷冻保存细胞之方法：
人弥漫大B细胞细胞形态冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　人弥漫大B细胞细胞形态
种属:OCI-LY3

提供形式:T25细胞培养瓶/冻存管

模式菌株:未知

培养方法

培养基:90% IMDM+10% FBS

生长条件:95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度

生长特性:悬浮生长

存储条件:50%IMDM+40%FBS+10%DMSO 液氮

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到人弥漫大B细胞细胞形态处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是人弥漫大B细胞细胞形态的相关热销产品：
ENPEP Others Mouse 小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸苯达莫司汀（标准品）Bendamustine HCl质量规格：HPLC>98%,标准品

CL-0310VE(人内皮细胞)5×106cells/瓶×2澳洲茄边碱（标准品）Solamargine质量规格：HPLC≥95%,标准品

RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞 人单核细胞型瘤，THP1细胞 GC-2spd(ts)(小鼠精母细胞)澳洲茄碱（标准品）Solasonine质量规格：HPLC≥94.50%,标准品

绿色荧光蛋白标记人细胞;MGC803-GFP安格洛苷 C（标准品）Angoroside C质量规格：>98%,标准品

EPCAM Others Human 人 EpCAM / OP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 托瑞米芬Toremifene 质量规格：>98%,BR
人永生化细胞;CNLMG-B5538LC别嘌醇（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Allopurinol

HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Canada/720/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 1丙基雌醇;1丙雌醇质量规格：含量≥98.0%Allylestrenol

CL-0412PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×21丙基雌醇(标准品)质量规格：HPLC≥97.0%，标准品Allylestrenol

S100A8 Others Human 人 S100A8 / CAGA / p8 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 阿利新蓝8GX质量规格：BS级,干品含量>50%Alcian blue 8GX

人真皮管内皮细胞RNAHDLEC miRNA5 μg四氮唑蓝；BT质量规格：BSBlue tetrazolium
hMoCD14+-PB-c single donorpre-screened 外周血来源的人类CD14+单核细胞，单一来源，预选型 10 million 人结膜成纤维细胞HConF4'-庚基苯乙酮(>96.0%(GC))质量规格：>96.0%(GC)4'-Heptylacetophenone

人眼球脉络膜成纤维细胞HOCF4'-正辛基苯乙酮(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)4'-n-Octylacetophenone

SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人细胞裂解液 (阳性对照) 4'-戊基苯乙酮(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)4'-Pentylacetophenone

非洲绿猴肾细胞;CV-14-(反-4-丙基环己基)苯腈(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)4-(trans-4-Propylcyclohexyl)benzonitrile

NCI-H1975细胞，人非小细胞 鼠肝星形细胞,HSC-T6细胞 CM-R047大鼠肠微细胞完全培养基100mL4-磺酰杯[4]芳烃水合物(>94.0%(T))质量规格：>94.0%(T)4-Sulfocalix[4]arene Hydrate
人弥漫大B细胞细胞形态EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸平阳霉素（标准品）Bleomycin A5  质量规格：HPLC含量测定

大鼠皮下脂肪细胞完全培养基 100mL琥乙红霉素（标准品）Erythromycin ethylsuccinate质量规格：杂质检查

FRhK-4恒河猴胚肾细胞 FRhK-4 Ganges RIver monkey embryo kidney cell DMEM培养基+10%FBS灰黄霉素（标准品）Griseofulvin质量规格：含量测定

IFNA1 Protein Rat 重组大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 标签)Tivantinib(ARQ197)Tivantinib, ARQ 197质量规格：>98%，c-Met抑制剂

MCF 7B(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 BHK(幼仓鼠肾细胞)3-乙氧基－4－羟基苯（标准品）Ethyl vanillin质量规格：系统适应性