人正常子宫颈上皮细胞培养冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人正常子宫颈上皮细胞培养
种属:HcerEpic

提供形式:T25细胞培养瓶

模式菌株:未知

培养方法

培养基:90%EMEM(MEM+NEAA)+10%FBS

生长条件:95%空气+5%二氧化碳37摄氏度

生长特性:贴壁生长

存储条件:90%FBS+10%DMSO 液氮
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人正常子宫颈上皮细胞培养的相关热销产品：
人肺泡上皮细胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg达那唑（标准品）Danazol质量规格：含量测定

FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人细胞裂解液 (阳性对照) 氨苯蝶啶（标准品）Triamterene质量规格：HPLC法含量测定

人脐内皮细胞完全培养基 100mL拉呋替丁Lafutidine质量规格：>99%,BR

HSC-T6细胞，鼠肝星形细胞 SW620(细胞) 人低转移细胞株;PC-3M-2B4拉呋替丁（标准品）Lafutidine质量规格：HPLC>98%,标准品

CSF1 Protein Mouse 重组小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白托可索仑/维生素E聚乙二醇琥珀酸酯Tocofersolan,VE-TPGS质量规格：VE含量≥260.00mg/g as dl-α-tocopherol
人髓核细胞cDNAHNPC cDNAdTTP;2‘-脱氧胸苷-5’三1酸钠盐(dTTP)质量规格：>98%,BR2'-deoxythymidine-5'-triphosphate (dTTP),3 salt, dihydrate

T47D细胞，人管癌细胞 猪肾细胞系,IBRS-2细胞 Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)2‘-脱氧尿苷质量规格：>99%,BR2'-Deoxyuridine

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞前体细胞) 5×106cells/瓶×2β-胸苷(dT);2'-脱氧胸苷质量规格：>99%,BRThymidine

HCMEC Pellet 人*微内皮细胞团块 > 1 mio.cells 纤维母细胞粘附检测试剂盒FibroDBD-F [=4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并恶二唑](>98.0%(HPLC))质量规格：>98.0%(HPLC)DBD-F [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]

CL-0259BC-020(人癌细胞)5×106cells/瓶×2N-(1-芘基)马来(>97.0%(HPLC))质量规格：>97.0%(HPLC)N-(1-Pyrenyl)maleimide
A-375[A375]细胞，恶性色素瘤细胞 细胞,Jurk. Clone E6-1细胞 人皮肤鳞癌细胞;A-431 [A431](S)-萘普生异酰基-β-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口(S)-Naproxen Iso-acyl-β-D-glucuronide

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich(R)-酰基萘普生-β-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口(R)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide

DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人细胞裂解液 (阳性对照) (1RS)-1-(6-甲氧-2-萘基)乙醇(萘普生杂质K)质量规格：美国进口(1RS)-1-(6-Methoxy-2-naphthyl)ethanol (Naproxen Impurity K)

人视网膜色素上皮细胞HRPEpiC6'-甲氧基-2'-萘乙酮 (萘普生杂质 L)质量规格：美国进口6'-Methoxy-2'-acetonaphthone (Naproxen Impurity L)

EPO Others Rat 大鼠 Erythropoietin / EPO 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (S)-普拉克索二盐酸化物质量规格：美国进口(S)-Pramipexole Di
人正常子宫颈上皮细胞培养原代单核细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml盐酸吉西他滨（标准品）Gemcitabine HCl质量规格：HPLC>99%,标准品

BLK Others Human 人 BLK / B Lymphocyte Kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺酸吉米沙星Gemifioxacin Mesylate质量规格：>98.5%,BR

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系*);CHO-K1甲磺酸吉米沙星（标准品）Gemifioxacin Mesylate质量规格：HPLC>98%,标准品

A549[A-549]细胞，细胞 人细胞,SMMC-7721细胞 T-104BII型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL胆酸钠 cholate质量规格：>98%,牛或羊胆汁,培养基用

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]醋酸胰素Glucagon Acetate质量规格：purity>97%,BR
收到人正常子宫颈上皮细胞培养处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。