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人肝内细胞系培养
  • 品牌:莼试
  • 产地:进口、国产
  • 货号:CSX3526
  • 发布日期: 2020-06-03
  • 更新日期: 2024-07-25
产品详请
产地 进口、国产
品牌 莼试
货号 CSX3526
用途 公司产品仅用于科研
组织来源 详见说明书
细胞形态 上皮样
是否是肿瘤细胞
规格 详见说明书
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 详见说明书
品系 详见说明书
生长状态 贴壁生长
物种来源 详见说明书
纯度 详见说明书%
是否进口

人肝内细胞系培养冷冻保存细胞之方法:

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 30~60 分钟-20 30 分钟* → -80 16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤:

资源名称 人肝内细胞系培养
种属:LICCF

形态:上皮样

培养方法

培养基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarlesBalancedSalts)10%FBS

生长特性:贴壁生长
细胞分类:
第一种:
是冻存产品,由氮直液接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)
质量保证:我们的细胞株来源于ATCCECACCDSMZJCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程:

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1
)准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)85%;北美胎牛血清(United StatesGIBCO,货号16000-044)15%
2
)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%
3
)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1
)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.
2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按1215的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人肝内细胞系培养的相关热销产品:
青霉素/链霉素溶液P/SL-脯氨酰胺L-Prolinamide质量规格:0.98

VEGFA Others Canine VEGF / VEGFA 人细胞裂解液 (阳性对照) L-谷氨酸(标准品)L-Glutamic acid质量规格:>99%(TLC),标准品

人急性T细胞细胞;Jurkat, Clone E6-1L-谷氨酸(sigma)L-Glutamic acid质量规格:>99%,Sigma分装

H7402细胞,人细胞 小鼠艾氏腹水癌细胞,EAC细胞 非洲绿猴肾细胞;VERO-76DL-谷氨酸DL-Glutamic acid monohydrate质量规格:>98%,水合物

MGC80-3(人细胞) 5×106cells/瓶×2肌氨酸Sarcosine 质量规格:>99%,BR
非洲绿猴肾细胞;VERO C1008 (E6) 中国仓鼠肺细胞,V79细胞 HCCC-9810(胆管细胞型细胞)分子筛, 5 ?(干燥剂用)质量规格:干燥剂用Molecular sieves, 5 ?

EB病毒转化的人B细胞;KMY1008分子筛, 5 ?(pellets,3-5 mm)质量规格:pellets,3-5 mmMolecular sieves, 5 ?

CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人细胞裂解液 (阳性对照) 格列齐特质量规格:>95%,BRGliclazide

CM-R029大鼠肠平滑肌细胞完全培养基100mL格列齐特(标准品)质量规格:HPLC>95%,标准品Gliclazide

CDH18 Others Cynomolgus 食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 人细胞裂解液 (阳性对照) 格列本脲质量规格:>99%,BRGlyburide/Gliebenclamide
ARPE-19(人视网膜上皮细胞) 5×106cells/瓶×2泛影酸钠(>98%,BC)质量规格:>98%,BC diatrizoate dihydrate

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人细胞裂解液 (阳性对照) 氟铝酸钠(>质量规格:>98%,BR fluoroaluminate

兔肾细胞;RK-13马尿酸钠(>质量规格:>98%,BR hippurate

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) (>95%,BR)质量规格:>95%,BR laurate

Ishikawa 人细胞吡嗪(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Pyrazine
人肝内细胞系培养小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12神经肽Y2-36),人,大鼠Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)质量规格:>95%,BR

GGT1 Others Rat 大鼠 GGT1 人细胞裂解液 (阳性对照) 神经肽Y22-36Neuropeptide Y (22-36)质量规格:>95%,BR

人平滑肌细胞完全培养基 100mL神经肽Y3-36),猪Neuropeptide Y (3-36)(porcine)质量规格:>95%,BR

M1细胞,小鼠细胞 脆弱拟杆菌 新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF骨钙素(7-19),人Osteocalcin (7-19) (human)质量规格:>95%,BR

CXCL12 Protein Human 重组人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)成骨生长肽Osteogenic Growth Peptide质量规格:>95%,BR
收到人肝内细胞系培养处理方法
1
、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2
、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3
、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4
、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5
、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6
、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。