大鼠膝关节退变软骨细胞 冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　大鼠膝关节退变软骨细胞
种属:C518

提供形式:T25细胞培养瓶/冻存管

模式菌株:未知

培养方法

培养基:90%高糖DMEM/F-12+10%FBS+0.3mg/ml G418

生长条件:95%空气+5%二氧化碳37摄氏度

生长特性:贴壁生长

存储条件:50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是大鼠膝关节退变软骨细胞 的相关热销产品：
小鼠细胞;L1210Nα-BOC-D-精氨酸盐酸盐一水合物Nalpha-BOC-D-Arginine  hydrate质量规格：BR

HELF细胞，人胚 鼠胚成骨细胞,3T3-E1细胞 CL-0146LTEP-a-2(人)5×106cells/瓶×2Boc-Arg(Mts)-OH·CHABoc-Arg(Mts)-OH·CHA质量规格：BR

TM3(小鼠间质细胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-缬氨酸Boc-Val-OH质量规格：>99%,BR

HPF-c 人类(HPF) 500,000cells 腮腺细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)BOC-L-天冬酰胺Boc-Asn-OH质量规格：≥98.5%,BR

脑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)Boc-L-谷氨酰胺Boc-Gln-OH质量规格：>98.5%,BR
TIMP2 Others Human 人 TIMP2 / TIMP-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2‘-脱氧胞苷质量规格：>98%,BR2'-Deoxycytidine;2'-dC

CL-0167NCI-H292(人细胞)5×106cells/瓶×22‘-脱氧胞苷(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品2'-Deoxycytidine;2'-dC

CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2’-脱氧腺苷质量规格：>99%,BR2'-Deoxyadenosine monohydrate

小鼠肠内皮细胞完全培养基 100mL鱼精DNA质量规格：进分，Sigma74782,蛋白小于1%DNA, Fishsperm

marc-145猴胚胎肾上皮细胞 Marc-145 monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10% FBS2,5-二苯基恶唑(>98%,BC)质量规格：>98%,BCPPO
人神经母细胞瘤细胞;SH-SY5Y1,4-二羟基醌shēng huà shì jì容量：RT25克

21. 脐带细胞系统四正丁基化铵 Tetrabutylammonium chloride.≥97.0 1112-67-0 5G 通用试剂

CM-H104真皮成纤维细胞完全培养基100mLα-异十三烷基-ω-羌基-聚(氧-1,2-亚基) GqNcPOL(R) X-080 9043-30-2

小鼠胚胎成纤维细胞;PA317 小鼠小肠平滑肌细胞完全培养基 100mLN-Hexadecane正十六烷*无色液体RTsigma

RN-c, 大鼠皮质神经元 Rattus67-43-6二异胺DiisopropylaMine;N-(1-metxyletxyl)-2-propanaMine; DIPA;
大鼠膝关节退变软骨细胞 BxPC-3, 人原位*腺癌细胞株水杨酸-4-辛基苯酯(>95.0%(GC))4-Octylphenyl Salicylate质量规格：>95.0%(GC)

人类原巨核细胞型细胞;UT-7 大鼠膀胱上皮细胞完全培养基 100mL氧化偶氮苯-4,4'-二羧酸二乙酯(>97.0%(GC))Diethyl Azoxybenzene-4,4'-dicarboxylate质量规格：>97.0%(GC)

LM-8 小鼠4,4'-双(己氧基)氧化偶氮苯(>96.0%(N))4,4'-Bis(hexyloxy)azoxybenzene质量规格：>96.0%(N)

FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,4'-二戊氧基氧化偶氮苯(>95.0%(N))4,4'-Diamyloxyazoxybenzene质量规格：>95.0%(N)

小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH24,4'-二丁氧基氧化偶氮苯4,4'-Dibutoxyazoxybenzene质量规格：
收到大鼠膝关节退变软骨细胞 处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。