615小鼠瘤株培养冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　615小鼠瘤株培养
种属：HP615

形态：实体瘤

模式：菌株未知

培养方法

培养基：-

传代方法：制备成细胞悬液接种至615等小鼠。

生长特性：体内生长

存储条件：基础培养基：+5%DMSO+20%FBS
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是615小鼠瘤株培养的相关热销产品：
*微内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)碳酸钾无水(>Potassium carbonate, anhydrate质量规格：>98%，BR

Dami细胞，人巨核细胞保细胞 小鼠网织细胞,M5076细胞 上皮细胞生长添加物PEpiCGS牛磺酸(>98.5%，JP )Taurine质量规格：>98.5%，JP

NCI-H2227(人小细胞细胞) 5×106cells/瓶×21,5-萘二磺酸二钠盐(>97%,BR)Naphthalene-1,5-disulfonic acid di salt质量规格：>97%,BR

BSC-1(猴肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M062小鼠肾小管上皮细胞完全培养基100mL 人细胞;PC-3 [PC3]1,5-萘二磺酸四水(>Naphthalene-1,5-disulfonic acid tetrahydrate质量规格：>98%

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2色酚AS醋酸盐(>98%,BC)Naphthol AS acetate质量规格：>98%,BC
JM 人急性T细胞细胞L-墨蝶呤质量规格：≥98%,美国进口L-Sepiapterin

LNCaP clone FGC人细胞 LNCaP clone human prostate cancer cell FGC RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS莫特塞尼质量规格：>99%Motesanib

CTF1 Protein Human 重组人 Cardioophin-1 / CTF1 蛋白 (Fc 标签)金双黄酮(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Sciadopitysin

小鼠颗粒神经元(MGC)(1×106) 6-10B, 人细胞系 Human10-羟基癸1酸,10-HDA(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品10-Hydroxy-2-decenoic acid

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21氯化银(>99%,BC)质量规格：>99%,BCSilver chloride
Lec1(仓鼠卵巢细胞) 5×106cells/瓶×2L-色酸盐酸盐shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

Promocell C-28015 Mesenchymal Stem CellNeurogenic Differe. Medium, 间充质干细胞神经性分化培养基(即用型) 100ml2′-脱氧胸苷-5′-... Thymidine 5′-monophosphate di s... 33430-62-5 100MG 通用试剂

人内皮细胞HCAEC六基鳞酰三安;六鳞安;三(二安基)氧膦 HqxcMqthylphosphorcMidq;HqxcMqthylphosphoric tricMidq;Tris(diMqthylcMino)phosphinq oxidq;HqxcMqtcpol;HqMpc;HMPT;HMPc;qNT-50882; 680-31-9

SERPINE1 Others Rat 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人细胞裂解液 (阳性对照) wo7ium1-pentanesulfonate1-磺酸钠5克AR，99.9%

非洲绿猴肾细胞;CV-1874-60-2对甲基本甲酰录P-Toluoyl chloride
615小鼠瘤株培养人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0萘夫西林钠(标准品)Nafcillin  salt monohydrate质量规格：HPLC>98%,标准品

小鼠前低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);MFC-B5-GFP 小鼠晶状体上皮细胞完全培养基 100mL阿托西班,醋酸阿托西班Atosiban Acetate质量规格：>98%,BR

EPC, 大鼠内皮祖细胞 Rattus曲格列汀Trelagliptin free base质量规格：>98%,BR

GLA Others Human 人 GLA / Alpha-galactosidase A 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢噻1钠,噻孢霉素,头孢霉素,先锋霉素ICefotaxime 质量规格：Purity>97%,Potency920ug/mg,USP

人真皮内皮细胞裂解物HDLECL头孢噻1钠(标准品)Cefotaxime 质量规格：效价测定
收到615小鼠瘤株培养处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。