人未分化细胞说明书冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　人未分化细胞说明书
种属：FRO

分离基物：未分化；男性

提供形式：T25细胞培养瓶/冻存管

模式：菌株未知

培养方法

培养基：90%高糖DMEM+10%FBS

生长条件：95%空气+5%二氧化碳37摄氏度

生长特性：贴壁生长

存储条件：50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是人未分化细胞说明书的相关热销产品：
97H-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)人细胞 97H-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of human hepatocellular carcinoma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin十二烷基苯磺酸钠标准溶液(1000μg/mL，溶剂：水)质量规格：1000μg/mL，溶剂：水 dodecylbenzenesulfonate solution

GDF10 Protein Mouse 重组小鼠 BMP-3b / GDF-10 蛋白 (Fc 标签)磺胺甲二唑(标准品)质量规格：分析标准品Sulfamethizole

人上皮细胞(HPEpiC)(5×105) 人羊膜间充质基质细胞 Human抑肽酶(来源于牛肺,胰蛋白酶抑制剂)质量规格：≥3TIU/mg,进分,来源: 牛肺或牛胰Aprotinin

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]E-64,蛋白酶抑制剂质量规格：>98%,BRE64

CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿齐沙坦酯质量规格：>98%,BRAzilsartan Medoxomil
hPC-PL-c 人类胎盘周细胞(hPC-PL) 500,000cells 小鼠巨噬细胞MMa巴洛沙星质量规格：度> 98.5%,BR,二水合物Balofloxacin Dihydrate

CL-0454TE-11(人细胞)5×106cells/瓶×2盐酸苯达莫司汀质量规格：度> 98%Bendamustine HCl

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸苯达莫司汀（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Bendamustine HCl

人膀胱平滑肌细胞RNAHBdSMC miRNA5 μg澳洲茄边碱（标准品）质量规格：HPLC≥95%,标准品Solamargine

兔眼Tenon's囊成纤维细胞;RYTF 细胞，Hep 3B2.1-7细胞 IR983F细胞，大鼠细胞澳洲茄碱（标准品）质量规格：HPLC≥94.50%,标准品Solasonine
人永生化表皮细胞;HaCaT1-氨基-2-萘酚-4-磺酸质量规格：AR1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照) 利卡西平；10,11-二氢-10-羟基卡马西平质量规格：>98%,美国进口原装10,11-Dihydro-10-hydroxy Carbamazepine

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B三七皂苷R2(S型)(标准品)质量规格：HPLC≥90%，标准品S-Notoginsenoside R2

LS174T细胞，人细胞 人色素瘤细胞,SK37细胞 人成细胞;Saos-2无水醋酸锌质量规格：AR acetate

HCT 116(人细胞) 5×106cells/瓶×25-氟吲哚-2-羧酸质量规格：>98%,原装进口5-Fluoroindole-2-carboxylic acid
人未分化细胞说明书PC-12细胞，大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化) HT-29(细胞) 人子宫内膜腺癌细胞;HEC-1-B洛匹那韦（标准品）Lopinavir质量规格：HPLC>98%,标准品

CXCL12 Protein Human 重组人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 标签)氯雷他定Loratadine质量规格：>99%

SVEC4-10(小鼠结内皮细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氯雷他定(标准品)Loratadine质量规格：>99%,标准品

人心肌细胞HCM褪素,果体素Melatonine质量规格：>99%,BR

A2M Others Human 人 A2M / CPAMD5 / Alpha-2-macroglobulin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 褪素,果体素（标准品）Melatonine质量规格：HPLC>98%,标准品
收到人未分化细胞说明书处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。