资源名称　人小梁网细胞产品仅用于科研
种属：gtm3

类型：贴壁生长

安全等级：1

模式：菌株未知

培养方法

培养基：DMEM+10%FBS（建议SERANA胎牛血清S-FBS-EU-015或GIBCO 16000-044胎牛血清）

传代方法：1:2~1:4，2-3天

生长条件：气相：空气95%，二氧化碳5% 温度：37℃

存储条件：90%FBS+10%DMSO
人小梁网细胞形态来源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室，可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。

培养操作步骤：
人小梁网细胞形态1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用*化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

操作流程：
产品仅用于科研1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线

以下是公司正在在热销的产品：
人海马神经元 人细胞，NCI-H226[H226]细胞 P388D1(瘤细胞)5‘-1酸吡哆醛，一水质量规格：>98%,BRPyridoxal 5-phosphate

人色素瘤细胞;A875NADPH;还原辅酶Ⅱ四钠盐;(罗氏)质量规格：>95%,罗氏进分Coenzyme II reduced tetra salt(NADPH)

AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人细胞裂解液 (阳性对照) 胰蛋白胨质量规格：FMB GradeTryptone

大鼠脑细胞;C6生物素;D-生物素;维生素 H 辅酶 R质量规格：>98%,BRD-Biotin

IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人细胞裂解液 (阳性对照) 甘油质量规格：>99%,分子生物学级Glycerol
HFDPC Pellet 人卵泡毛细胞团块 > 1 mio.cells 成纤维细胞培养基FM非诺贝特质量规格：>99%,EP6.0Fenofibrate

CL-0414PC-3M-IE8(人高转移细胞株)5×106cells/瓶×2非诺贝特（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Fenofibrate

FGF9 Others Canine 狗 FGF9 / FGF-9 人细胞裂解液 (阳性对照) 丙磺舒质量规格：>98%,BRProbenecid

人表皮角质细胞-RNAHEK-a miRNA5 μg阿仑1酸钠质量规格：HPLC>98%,标准品Alendronate

兔肾细胞;RK13 细胞，SW620细胞 Mouse podocyte细胞，小鼠肾足细胞别嘌醇质量规格：>99%,超Allopurinol
人羊膜间充质基质细胞雌激素酮-2,4,16,16-d4 3-硫酸钠盐质量规格：美国进口Estrone-2,4,16,16-d4 3-sulfate  salt

5E Others Rat 大鼠 CD73 / 5E 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-羟基雌激素酮质量规格：美国进口2-Hydroxy Estrone

人胚肺二倍体细胞;KMB-17雌激素酮 3-硫酸钾盐质量规格：美国进口Estrone 3-sulfate potassium salt

A498细胞，人细胞系 蝙蝠肺细胞,Tb 1 Lu细胞 CL-0430RS1(大鼠皮肤成纤维样细胞)5×106cells/瓶×2雌激素酮 3-甲酯质量规格：美国进口Estrone 3-methyl ether

EA.hy926(人脐细胞融合细胞) 5×106cells/瓶×24'-己基苯乙酮(>96.0%(GC))质量规格：>96.0%(GC)4'-Hexylacetophenone
人小梁网细胞形态QG-56细胞，肺扁平上皮癌细胞 人口腔上皮癌长春新碱耐药株,KB/V细胞 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C2硫唑嘌呤Azathioprine质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养

小鼠腹水瘤细胞;S-180盐酸巴尼地平Barnidipine HCl质量规格：>99%,BR

IFNGR1 Others Human 人 IFN-gamma R1 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸头孢吡1 Cefepime 质量规格：含量82.5%~91.1%（每毫克头孢吡1含量，干品）

人小脑颗粒细胞裂解物HCGCL盐酸头孢吡1 (标准品)Cefepime 质量规格：效价测定

EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 洛索洛芬钠Loxoprofen 质量规格：≥98.5%(按照干品计算)