产地 | 进口、国产 |
保存条件 | 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼试 |
货号 | CSX3954 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | 详见说明书 |
细胞形态 | CM1-1培养液中,贴壁,上皮样细胞,多角形 |
是否是肿瘤细胞 | 是 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 贴壁生长 |
物种来源 | 详见说明书 |
包装规格 | 详见说明书 |
纯度 | 详见说明书% |
是否进口 | 是 |
人肾小球系膜细胞培养来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。产品仅用于科研
产品名称 | 类型 | 佛号 |
人肾小球系膜细胞培养 | 贴壁生长 | CSX3954 |
资源名称 人肾小球系膜细胞
种属:HMC
类型:贴壁生长
形态:CM1-1培养液中,贴壁,上皮样细胞,多角形
分离基物:肾小球;系膜细胞
提供形式:复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级:1
模式:菌株未知
培养方法
传代方法:将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养;
生长条件:37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。
存储条件:冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。
培养操作步骤:
人肾小球系膜细胞培养产品仅用于科研1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用*化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
以下是公司正在在热销的产品:
PC-12(未分化) 大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤细胞(未分化)黄胺酸(>96.5%,BS)质量规格:>96.5%,BSFlavianic acid hydrate
DPP10 Others Human 人 DPP10 / DPRP3 人细胞裂解液 (阳性对照) 酸性品红钙(>60%,BS)质量规格:>60%,BSFuchsin acid calcium salt
大额牛皮肤细胞;BFR-S3血红素(>95%,BR)质量规格:>95%,BRHematin
VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人细胞裂解液 (阳性对照) 聚乙二醇800质量规格:BRPEG 800
弹性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL炔雌;炔雌醇环戊质量规格:USPQuinestrol
GBA3 Others Human 人 GBA3 / CBGL1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 茶多酚;绿茶提取物质量规格:多酚含量≥98Tea polyphenol
Sars结构蛋白表达株;293sars181A四氢姜黄素 质量规格:HPLC≥98%,BRTetrahydrocurcumin
SW579细胞,人细胞 人细胞系,HNE2-LMP1细胞 CL-0363Hs68(人男性正常细胞)5×106cells/瓶×2管花苷A(标准品)质量规格:HPLC≥98,标准品Tubuloside A
中国仓鼠卵巢细胞(亚系*);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA2’-乙酰基毛蕊花糖苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品2'-Acetylacteoside
LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸氟桂利嗪质量规格:>99%,BRFlunarizine
VERO细胞衍生株;SVPAGAROSEI/TAEBLEND2.0%琼脂糖 - TAE 混合物 2.0%生物技术级100GRT
OS-RC-2细胞,细胞 小细胞,SH-77细胞 人Wilms细胞;G401典化铋钾;典化铋合四典化钾 BisMuth potcssiuM iodidq 41944-01-8
KM小鼠子瘤株;U145'-ATP,Na25-三嶙酸腺苷二钠盐100UBR,98%
ICOSLG Others Mouse 小鼠 B7-H2 / CD275 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-甲基吲哚,英文名或英文缩写:2-metxylindole,级别:BR,48-50℃,规格:100克
人胚胎;WI-38Pectin 25g/100g/500g/1kg原装 Sigma P9135
人肾小球系膜细胞培养tTA基因修饰的小鼠(B类);P19-CAG-tTA-3C3链霉亲和素Streptavidin from Streptomyces avidinii质量规格:>15Units/mg protein
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 西他沙星Sitafloxacin Hydrate质量规格:>98.5%,水合物,BR
人食道平滑肌细胞RNAHESMC miRNA5 μgDHBS;3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠DHBS质量规格:>99%
SLIK6 Others Human 人 SLIK6 人细胞裂解液 (阳性对照) BGP;β-甘油1酸钠水合物(高)Di beta-glycerophosphate pentahydrate质量规格:>99%,BR,5水合物
人脐动脉内皮细胞完全培养基 100mLFura 2-AM;钙荧光探针Fura 2-AM质量规格:>95%,进口
操作流程:
1.1主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线