细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
人表柔比星耐药细胞株说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　人表柔比星耐药细胞株说明书
种属:MDA-MB-231/EP1

形态:上皮样

培养方法

培养基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生长特性:贴壁生长

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到人表柔比星耐药细胞株说明书处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是人表柔比星耐药细胞株说明书的相关热销产品：
CV-1 [Part of the Wistar Special Collection]非洲绿猴肾细胞 CV-1 [Part of the Wistar Special Collection] in African green monkey kidney cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS醋酸阿拉瑞林/丙氨瑞林 质量规格：>98%,BRAlarelin Acetate

IFNB1 Protein Human 重组人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白阿仑1酸钠质量规格：>99%,USPAlendronate

KiMA(人胚肾上皮细胞系) 5×106cells/瓶×2 艰难梭菌Closidium difficile细胞弛素E(>质量规格：>98%，BRCytochalasin E

肠动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)D-樟脑酸(>99%,BR)质量规格：>99%,BRD-(+)-Camphoric acid

SERPINB2 Others Human 人 SerpinB2 / PAI-2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) D(+)-二苯甲酰1酸一水(>质量规格：>98%，BRD-(+)DBTA, Dibenzoyl-D-tartaric acid, monohydrate
FaDu(人咽鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0299NCI-H460(人细胞)5×106cells/瓶×2 兔晶体上皮细胞永生系;N/N1003A(RLE)神经肽W-30，人质量规格：>95%,BRNeuropeptide W-30 (human)

正常大鼠肾细胞;NRK-52E神经肽W-30，大鼠质量规格：>95%,BRNeuropeptide W-30 (rat)

CN3 Others Rat 大鼠 Coactin 3 / CN3 人细胞裂解液 (阳性对照) 神经降压素（1-8）质量规格：>95%,BRNeurotensin (1-8)

人成纤维细胞完全培养基 100mL神经肽Y（13-36），猪质量规格：>95%,BRNeuropeptide Y (13-36)(porcine)

T6细胞，人舌癌细胞 甲型副伤寒沙门氏菌 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E芍药内酯苷(标准品）质量规格：HPLC≥96.50%，标准品Alibiflorin
小鼠背部脊髓神经元(MN-dsc)(1×106)考马斯亮蓝G250shēng huà shì jì容量：2～8°C1克

仓鼠肾细胞;HL-12,4,5-三氧基本全;细忻全 2,4,5-TriMqthoxybqnzcldqhydq;cscrylcldqhydq;2,4,5-Trixy7noxybqnzcldqhydq triMqthyl qtqr 4460-86-0

小鼠树突状细胞低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFP 小鼠内脏脂肪细胞完全培养基 100mL无水钙shēng huà shì jì容量：5克

HET-1A, 人食管上皮细胞 HumanCALCIUMCHLORIDE,1MSTERILE录化钙无菌溶液,1M生物技术级100MLRT

CD209B Others Mouse 小鼠 CD209B / DC-SIGNR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 97-67-6L-苹果酸L(-)-Malic acid
人表柔比星耐药细胞株说明书小鼠树突状细胞低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP 小鼠表皮色素细胞完全培养基 100mL拉西地平（标准品）Lacidipine质量规格：含量测定

RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞 Mouse拉西地平Lacidipine质量规格：>99%,BR

LRPAP1 Others Mouse 小鼠 LRPAP1 / RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 尼林（标准品）Nicergoline质量规格：含量测定

人肾上皮细胞裂解物HREpiCL盐酸赛洛唑啉（标准品）Xylometazoline 质量规格：HPLC>98%,标准品

LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸赛洛唑啉Xylometazoline 质量规格：>98%,BR