细胞培养过程：

产品仅用于科研冷冻保存细胞之方法：
人整合SV40基因的乳腺上皮细胞说明书冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

资源名称　人整合SV40基因的乳腺上皮细胞说明书
种属:HBL-100[HBL100]

形态:上皮细胞样

培养方法

培养基:DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

生长特性:贴壁生长

细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞冻存步骤：

细胞培养步骤：
产品仅用于科研一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

收到人整合SV40基因的乳腺上皮细胞说明书处理方法
1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
以下是人整合SV40基因的乳腺上皮细胞说明书的相关热销产品：
GKN1 Others Human 人 GKN1 / Gasokine 1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 1霉素钙（水溶）质量规格：>98%Fosfomycin Calcium

EB病毒转化的人B细胞(彝族);KM9341霉素钠质量规格：>96%Fosfomycin

豹猫肺成纤维样细胞;LCL2 中国仓鼠肺细胞，V79-4细胞 3T6-Swiss albino细胞，小鼠胚胎成纤维细胞柠檬酸锂四水(>质量规格：>98%,BRLithium , tetrahydrate

人胚;IMR-904-甲基伞形酮酰-beta-D-吡喃糖苷质量规格：分子生物学级MU-Gal

HA Others H8N4 甲型 H8N4 (A/piail duck/Alberta/114/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-甲基伞形酮酰-Β-D-吡喃葡糖酸苷质量规格：>99%，分子生物学级MU-GLU
CL-0079ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞)5×106cells/瓶×2癸二酸二丁酯(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)Dibutyl Sebacate

IL17RC Others Human 人 IL17RC 人细胞裂解液 (阳性对照) 癸二酸二甲酯(>97.0%(GC))质量规格：>97.0%(GC)Dimethyl Sebacate

小鼠小肠平滑肌细胞完全培养基 100mL癸二酸二正辛酯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)Di-n-octyl Sebacate

CNE人细胞 Human nasopharyngeal carcinoma cell line CNE 1640+10%FBS三乙二醇二甲基（添加稳定剂BHT）(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)Triethylene Glycol Dimethyl Ether (stabilized with BHT)

CF Protein Human 重组人 CF 蛋白 (His 标签)油酸酰胺(>65.0%(GC))质量规格：>65.0%(GC)Oleamide
CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) L-CYSTINEL-胱酸美国药典级白色晶体或结晶粉末RTsigma

白牦牛皮肤细胞;Yak-2氢氧化锆 Zirconium(IV) hydroxide,97% 14475-63-9 100G 通用试剂

NCI-H596细胞，人肺腺鳞癌细胞 小鼠Mo-MuLv感染的3T3细胞,Mo-MuLV/3T3细胞 CM-R079大鼠平滑肌细胞完全培养基100mLGDX-303

RH-35(大鼠细胞) 5×106cells/瓶×2COA4-羧酸100克IND

Gibco 12678017 LHC-8 MEDIUM 500 ml13826-83-0扶硼酸铵Ammonium fluoborate
人整合SV40基因的乳腺上皮细胞说明书ADAM9 Others Mouse 小鼠 ADAM9 人细胞裂解液 (阳性对照) 杆菌肽Bacitracin质量规格：>65IU/MG,BR

HCC827 人非小细胞细胞盐酸阿米替林Amitriptyline HCl 质量规格：>98%,USP31

2V6.11人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line 2V6.11 MEM培养基(GIBCO)+10%FBS苯磺酸氨氯地平（络活喜、安洛地）Amlodipine Besylate质量规格：>99%,EP 6.4,BR

TNF Protein Ferret 重组雪貂 TNF-alpha / TNFA 蛋白苯磺酸氨氯地平（标准品）Amlodipine Besylate质量规格：HPLC>98%,标准品

人成纤维细胞(HMF)(5×105) HuH-7人细胞 Human盐酸阿莫罗芬/盐酸阿莫洛芬 Amorolfine 质量规格：≥99,BR