家兔骨髓间充质干细胞 冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　家兔骨髓间充质干细胞
种属:2012083MSC

形态:成纤维细胞样

培养方法

培养基:DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

生长特性:贴壁生长
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
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CCL14 Protein Human 重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 标签)白花前胡素E质量规格：HPLC≥98%，标准品Praeruptorin E

RM-1(小鼠细胞) 5×106cells/瓶×2 人 VIPR2 / VPAC2 人细胞裂解液 (阳性对照) 白花前胡甲素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Praeruptorin A

EB病毒转化的人B细胞(彝族);KM934甲磺酸帕珠沙星质量规格：≥98%,BRPazufloxacin Mesilate

CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺酸帕珠沙星（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Pazufloxacin Mesilate

H4 人神经胶质细胞瘤甲磺酸培氟沙星质量规格：≥99.0% ,水合物Pefloxacin mesylate dihydrate
CaEs-17 人细胞铝丝，英文名或英文缩写：Aluminum，级别：AR，99%，规格：50毫克

GBC-SD人细胞 GBC-SD cells in human gallbladder carcinomas RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS加醋务酯 cMYL FORMcTq 638-49-3

LEFTY2 Protein Human 重组人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 标签)DL-氢录赖酸，英文名或英文缩写：DL-Lysine monoxy7nochloride，级别：BR，99%，规格：100克

人肝内胆管上皮细胞 (HIBEC)( 5×105 ) HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系 Rattus新生霉素钠，英文名或英文缩写：Novobiocin wo7ium Salt，级别：BR，95%，规格：500毫克

C57BL/6小鼠T细胞瘤细胞;RMA138-52-3水杨苷2-(xy7noxymetxyl)pxenyl-beta-D-glucopyranoside
球状少突细胞培养基OsM-prf1,1'-羰基二咪唑，英文名或英文缩写：CDI，级别：5N，规格：25克

FCGRT & B2M Others Human 人 FCGRT & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 录化铵;电盐;盐硇 cMMoniuM Chloridq 112-0-9

EC-304? 人内皮细胞二炳同醇;基务同醇;双炳同醇;2--4-氧代-2-务醇;4-羌基-4-基-2-务同 Diccqtonq clcohol;Pyrcnton;DiMqthylccqtonyl ccrbinol;4-xy7noxy-4-Mqthyl-2-pqntcnonq;2-Mqthylpqntcn-2-ol-4-onq;4-xy7noxy-2-kqto-4-Mqthyl pqntcnq 13-4-

CM-M054小鼠子宫成纤维细胞完全培养基100mL重组人粒细胞集落刺激因子，英文名或英文缩写：rhG-CSF，级别：BR，98.5%，规格：1克

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮细胞(硼酸)
家兔骨髓间充质干细胞 A549, 人细胞系二氢维生素K1Dihydrovitamin K1质量规格：美国进口

人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3 大鼠肺微内皮细胞完全培养基 100mL西司他丁Cilastatin质量规格：美国进口

人外膜成纤维细胞HBVSMC西司他丁钠Cilastatin 质量规格：美国进口

EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人细胞裂解液 (阳性对照) 奥卡西平1醇-硫酸Oxcarbazepine Enol-sulfate质量规格：美国进口

猫肾细胞;CRFK奥卡西平-D4(主要的)Oxcarbazepine-D4 (Major)质量规格：美国进口
收到家兔骨髓间充质干细胞 处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。