大额牛肾细胞形态冷冻保存细胞之方法：

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ （-20 ℃30 分钟*） → -80 ℃16~18 小时（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 ℃不可超过1 小时， 以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤：

资源名称　大额牛肾细胞形态
种属:BFR-K1

形态:上皮样

培养方法

培养基:M-199:withEarle＇sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

生长特性:贴壁生长
细胞分类：
第一种：
是冻存产品，由氮直液接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：产品仅用于科研
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程：

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，货号16000-044)，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
以下是大额牛肾细胞形态的相关热销产品：
HBSMC Pellet 人平滑肌细胞团块 > 1 mio.cells 人间充质干细胞-脂肪裂解物HMSC-ad LEDDAB十二烷基乙基化25毫克BS

CL-0130K-562(人细胞)5×106cells/瓶×2溴全缩二醇(含稳定剂碳醋钾) Bromoccqtcldqhydq dimqthyl ccqtcl 72-83-7

ADAM15 Others Human 人 ADAM15 CHO细胞裂解液 (阳性对照) 曙红 Y (二钠盐) Eosin Y di salt (Dye content, ≥... 17372-87-1 10G 染色剂

人肺泡上皮细胞裂解物HPAEpiCLDibutylphosphate嶙酸二丁酯250克AR，97%

鼬肺上皮细胞;MV-1-Lu *癌细胞，PANC-1细胞 3T3 clone A31细胞，小鼠胚胎成纤维细胞L-Leucine 25g/100g/250g/500g 国产
ACP5 Others Human 人 ACP5 / AP 人细胞裂解液 (阳性对照) L-丙氨酸异丙酯盐酸盐质量规格：>98%L-Alanine isopropyl ester

CL-0402NCI-H520(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2L-天冬酰胺甲酯盐酸盐质量规格：0.98Methyl L-asparaginate mono

IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人细胞裂解液 (阳性对照) L-天冬氨酸二叔丁基酯盐酸盐质量规格：>98%,BRL-Aspartic acid di-tert-butyl ester

小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基 100mLPD0325901质量规格：>99%,ATP非竞争性的MEK抑制剂PD-0325901

U266人细胞 U266 human myeloma cell 1640+15% FBS西他塞坦钠/司他生坦钠质量规格：度99%Sitaxsentan ; TBC-11249; Thelin
人雪旺细胞HSC4,4'-二壬氧基氧化偶氮苯质量规格：4,4'-Dinonyloxyazoxybenzene

SLC27A4 Others Human 人 SLC27A4 / FATP4 人细胞裂解液 (阳性对照) 4'-(反-4-戊基环己基)二苯基-4-甲腈(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)4'-(trans-4-Amylcyclohexyl)biphenyl-4-carbonitrile

犬肾细胞;MDCK(NBL-2)4-戊氧基苯(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)4-Amyloxybenzaldehyde

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21 细胞，TE-10细胞 MA-104细胞，猴肾细胞系4-丁氧基苯(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)4-Butoxybenzaldehyde

SK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞 Human4,4'-二羟基二苯(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)4,4'-Dihydroxydiphenyl Ether
大额牛肾细胞形态CD40 Others Mouse 小鼠 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) 碲标准溶液(100μg/ml，基体:HCI)Tellurium standard质量规格：100μg/ml，基体:HCI

MSTO-211H 人细胞株铥标准溶液(1000μg/mL,基体：10%HCL)Thulium standard质量规格：1000μg/mL,基体：10%HCL

NCI-H1299人非小细胞细胞 NCI-H1299 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS钒标准溶液(500mg/L,溶剂：水)Vanadium standard质量规格：500mg/L,溶剂：水

GRN Protein Mouse 重组小鼠 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 标签)钒标准溶液(100mg/L,基体:1%HCI)Vanadium standard质量规格：100mg/L,基体:1%HCI

人胚肺二倍体细胞;KMB-17 人甲状腺滤泡上皮细胞完全培养基 100mL镱标准溶液(1000μg/ml)Ytterbium standard质量规格：1000μg/ml
收到大额牛肾细胞形态处理方法
产品仅用于科研1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。