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小鼠胚胎干细胞CE3(干细胞库保藏)培养
  • 品牌:莼试
  • 产地:进口、国产
  • 货号:CSX4446
  • 发布日期: 2020-06-10
  • 更新日期: 2024-04-16
产品详请
产地 进口、国产
品牌 莼试
货号 CSX4446
组织来源 详见说明书
细胞形态 球形克隆
是否是肿瘤细胞
规格 详见说明书
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 详见说明书
品系 详见说明书
用途范围 公司产品仅用于科研
生长状态 小鼠胚胎内细胞团
物种来源 详见说明书
纯度 详见说明书%
是否进口

小鼠胚胎干细胞CE3(干细胞库保藏)培养冷冻保存细胞之方法:

冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 30~60 分钟-20 30 分钟* → -80 16~18 小时(或隔夜)液氮槽vaporphase 长期储存。
冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
细胞冻存步骤:

资源名称 小鼠胚胎干细胞CE3(干细胞库保藏)培养
种属:CE3

类型:小鼠胚胎内细胞团

形态:球形*

培养方法

培养基:mES完全培养液配方(600 ml): DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ESFBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl(终浓度为1000U/ml β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。
细胞分类:
第一种:
是冻存产品,由氮直液接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)
第二种:产品仅用于科研
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)
质量保证:我们的细胞株来源于ATCCECACCDSMZJCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。
细胞培养过程:

细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1
)准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)85%;北美胎牛血清(United StatesGIBCO,货号16000-044)15%
2
)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%
3
)冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1
)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.
2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.
6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.
将细胞悬液按1215的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3
)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。
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二十酸甲酯(标准品)质量规格:≥98.0%(GC)Methyl Arachidate  小鼠雌激素受体β(ERβ)ELISA试剂盒 ,英文名: ERβ ELISA Kit  ratEndothelin1,ET-1ELISA试剂盒大鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T

反式玉米素质量规格:>99%,BR,可用于细胞培养trans-Zeatin  人优球蛋白(EL)ELISA检测试剂盒HumanEuglobulinLysis,ELELISAKit 96T/48T  Humandipeptidylpeptldase,DPPELISA试剂盒人二肽基肽酶Ⅳ(DPP)ELISA试剂盒规格:96T/48T

氯亚铂酸钾 质量规格:BR,铂含量 46%,原始铂粉度>99.95% Dipotassium tetrachloroplatinate  大鼠卵泡抑素(FS)试剂盒 Rat Follistatin,FS ELISA Kit  HumanHeatShockProtein40HSP-40ELISAKit人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒规格:96T/48T
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内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3)ELISA检测试剂盒MonkeyVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3ELISAkit 96T/48T  6817-41-0异莲心碱   Isoliensinine

犬缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)试剂盒 Canine Mullerian Inhibiting Substance/Ai-Mullerian Hormone,MIS/AMH ELISA Kit  2450-53-5异绿原酸A说明书  Isochlorogenic acid A

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化微粒体1脂酶D(PhospholipaseD)总活性荧光定量检测试剂盒20  32451-88-0异绿原酸C规格  Isochlorogenic acid C
27215-14-1新穿心莲内酯规格  Neoandrographolide    英文名称Ratt-PAELISAKit大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)规格:96T/48T

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27210-57-7新丹参酮   miltirone  英文名称RattotalhemolyticcomplemeELISAKit大鼠总溶血补体(CH50)规格:96T/48T

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27208-80-6虎杖苷品牌  Polydatin   英文名称RatTissuePolypeptideAigenELISAKit大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISAKit规格:96T/48T
小鼠胚胎干细胞CE3(干细胞库保藏)培养小鼠载脂蛋白H(APOH)ELISA试剂盒 ,英文名: APOH ELISA Kit  28831-65-4紫草酸规格  lithospermic acid

猴可溶性细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA检测试剂盒Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T  81907-62-2灵芝酸A   Ganoderic Acid A

犬结缔组织生长因子(CTGF)试剂盒 Canine connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit  33783-82-3HederacolchisideE说明书  Hederacolchiside E

英文名称HumahrombomodulinELISAKit人调节蛋白(TM)ELISA试剂盒规格:96T/48T  68027-15-64补充中2品牌  hederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(12)-(β-D-glucopyranosyl(14))-α-L-arabinopyranoside

化线粒体冻存液(酶学和膜结构保护)50毫升  848784-87-24补充中3规格  Lup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[ D-glucopyranosyl(14)[ L-rhamnopyranosyl) (12)-L-arabinopyranosyl]oxy], (3,4)-)
收到小鼠胚胎干细胞CE3(干细胞库保藏)培养处理方法
产品仅用于科研1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2
、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3
、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4
、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5
、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6
、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。