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产品分类
人1,25-二羟基维生素D3ELISA试剂盒
人1,25-二羟基维生素D3ELISA试剂盒
物品单位 品牌
莼试
  • 产地:进口、国产
  • 货号:CS-E9632
  • 发布日期: 2020-06-11
  • 更新日期: 2020-06-11
产品详细说明
产地 进口、国产
保存条件 低温冷藏
品牌 莼试
货号 CS-E9632
检测方法 详见说明书
CAS编号
保质期 详见说明书
规格 详见说明书
适应物种 详见说明书
检测限 1.5ng/mL~48ng/mL
数量 20
用途范围 公司产品仅用于科研
标记物 详见说明书
纯度 详见说明书%
样本 1,25-dihydroxyvitamin D3
应用 详见说明书
是否进口

公司常年代理eBioscience品牌、Mercodia品牌、Panbio品牌、Alpco品牌、CST品牌、IBL-America品牌、AbFrontier品牌、Calbiotech品牌、Anogen品牌、Ani Biotech品牌、AAT Bioquest品牌、Jaica品牌等elisa试剂盒。

             产品名称                                  英文名称                   
                 检测范围                
人1,25-二羟基维生素D3ELISA试剂盒1,25-dihydroxyvitamin D31.5ng/mL~48ng/mL

自备物品:

酶标仪(450nm)

高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

37℃恒温箱

自备的设备及试剂:

1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)

2. 单道或多道微量加液器及吸头

3. 稀释样品的EP管

4. 蒸馏水或去离子水

5. 吸水纸

6. 盛放洗液的容器

试剂盒性能:

 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

 灵敏度:*检测浓度小于0.1 pg/mL。

 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

 重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。

 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

 有效期:6个月

                双抗体夹心法(检测未知抗原)                                间接法(检测未知抗体)                   

1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。

2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。

3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。

4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。

2、加样:加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)

3、加酶标抗体:于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.05ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,*一遍用DDW洗涤。

4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。

5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

样品收集、处理及保存方法:

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

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载脂蛋白D抗体hnRNP M ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)ELISA试剂盒

酸敏感离子通道1抗体hnRNP L ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)ELISA试剂盒

双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体hnRNP K ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)ELISA试剂盒

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腺苷酸环化酶1抗体hnRNP H ELISA Kit异质性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)ELISA试剂盒

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操作流程如下:

(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 

(2)酶标板置4℃,包被过夜。

(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 

(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 

(6)洗板,同(4)。 

(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 

(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 

(9)洗板,同(4)。 

(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 

(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 

(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。