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流式鉴定小胶质细胞需要哪些关键抗体组合

发表时间:2026-08-11
小鼠小胶质细胞流式鉴定优化抗体配色、排除外周细胞干扰的实验背景,以下是适配不同实验需求的关键抗体组合方案,可精准圈出高纯度小胶质细胞群,同时彻底排除外周杂细胞干扰。

一、基础鉴定核心抗体组合(常规实验通用版)
基础圈门抗体:CD45 + CD11b,先通过CD45loCD11b+的经典表型,从全细胞群中初步圈出髓系来源的小胶质细胞候选群体,排除绝大多数外周高表达CD45的免疫细胞。
特异性鉴定抗体:TMEM119,这是小胶质细胞绝对特异性标志物,仅在中枢原位小胶质细胞上表达,完全不表达于外周巨噬细胞,可彻底区分小胶质细胞和残留的外周髓系细胞,是目前鉴定的金标准标记。
杂细胞排除抗体:CD31 + Ly6G + CD19,分别圈除内皮细胞、中性粒细胞、B细胞的残留干扰,进一步提升目标细胞群纯度。
二、高严谨度双验证抗体组合(科研高精度版)
在基础组合之上,额外加入?P2RY12?抗体,该标志物同样为小胶质细胞特异性表达,与TMEM119形成双阳性验证,完全避免单标记可能出现的假阳性结果,最终小胶质细胞纯度可达98%以上,适配高要求的亚群转录组测序等后续实验。
三、功能分群拓展抗体组合(表型研究版)
在高精度组合基础上,补充CD86、CD206两个功能标记,可同时将小胶质细胞进一步分群为促炎M1型和抗炎M2型亚群,在完成细胞鉴定的同时,同步获取小胶质细胞的活化功能状态信息,适配神经炎症相关的机制研究。
四、抗体配色搭配参考
高表达抗原(CD45、CD11b)搭配高亮度荧光素(Bv510、FITC),低表达特异性抗原(TMEM119、P2RY12)搭配中等亮度荧光素(PE、APC),杂细胞排除抗体搭配PE-Cy7、APC-Cy7等远红外通道荧光素,最大程度规避光谱重叠,减少荧光溢漏带来的结果误差。
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