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人R-脊椎蛋白2ELISA试剂盒操作流程

 

人R-脊椎蛋白2ELISA试剂盒操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

铁调节蛋白1抗体
三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗体
载脂蛋白J抗体
载脂蛋白H抗体
二磷酸腺苷核糖基转移酶4抗体
AKIRIN2蛋白抗体
ADP核糖基化样因子8B抗体
三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗体
AKIRIN1蛋白抗体
锚定蛋白样蛋白1抗体
腺苷酸激酶2抗体
精子顶体前体蛋白抗体
黑色素瘤缺失样蛋白1抗体
未知糖基化转移酶AER61抗体
铁蛋白Fe65抗体
抑癌基因ras同源家族1抗体
转录激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗体
心钠素抗体
丙氨酰tRNA合成酶2抗体
丝氨酸抑制蛋白激酶C底物抗体
核突触蛋白α抗体
自噬相关蛋白4B抗体
整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体