Hi,欢迎来到上海莼试生物技术有限公司!
客服热线:021-59541103
新闻中心
公司新闻

猪丹毒杆菌PCR检测试剂盒反应五要素

 

猪丹毒杆菌PCR检测试剂盒反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
载脂蛋白L3抗体
肿瘤/抗原81抗体
共济失调蛋白7样2抗体
砷酸盐耐药蛋白ARS2抗体
芳香基硫酸酯酶1抗体
砷酸盐转运三磷酸腺苷酶抗体
精氨酸tRNA的蛋白转移酶1抗体
共济失调蛋白7样1抗体
孤独症易感基因2蛋白抗体(自闭症相关蛋白1)
脊髓小脑共济失调2型蛋白抗体
芳香基硫酸酯酶H抗体
溴区结构域相邻锌指蛋白1A抗体
载脂蛋白1抗体
突触融合结合蛋白6抗体
精氨酸酶1抗体
腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体
三磷酸腺苷结合盒转运蛋白7抗体
磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体
Na+/K+-ATPase α1 钠钾ATP酶α1抗体
肌动蛋白样蛋白6B抗体
脊髓小脑共济失调蛋白7抗体
磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
β淀粉样前体蛋白结合蛋白1抗体(X11α)
载脂蛋白E抗体
甲胎蛋白AFP抗体