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洋葱伯克氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒反应五要素

 

洋葱伯克氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

人白介素19(IL-19)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-19 (Interleukin 19) ELISA Kit
人γ1肌动蛋白(ACTG1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ACTG1 (Actin Gamma 1) ELISA Kit
人辅肌动蛋白α2 (ACTN2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ACTN2 (Actinin Alpha 2) ELISA Kit
人辅肌动蛋白α3(ACTN3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ACTN3 (Actinin Alpha 3) ELISA Kit
人平滑肌肌动蛋白α2(ACTα2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ACTα2 (Actin Alpha 2, Smooth Muscle) ELISA Kit
人骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human ACTα1 (Actin Alpha 1, Skeletal Muscle) ELISA Kit 
人腺苷脱氨酶(ADA)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human ADA (Adenosine Deaminase) ELISA Kit
人解整合素金属蛋白酶10(ADAM10)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human ADAM10 (A Disintegrin And Metalloprotease 10) ELISA Kit
人解整合素金属蛋白酶8(ADAM8)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human ADAM8 (A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA Kit
人解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human ADAM9 (A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 
人ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human ADAMTS4 (ADAM with Thrombospondin Type 1 Motif 4) ELISA Kit
人腺苷酸环化酶1(ADCY1)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human ADCY1 (Adenylate Cyclase 1, Brain) ELISA Kit
人乙醇脱氢酶1(ADH1)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human ADH1 (Alcohol Dehydrogenase 1) ELISA Kit
人抗利尿激素(ADH)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit
人脂联素受体1(ADIPOR1)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human ADIPOR1 (Adiponectin Receptor 1) ELISA Kit
人脂联素受体2(ADIPOR2)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human ADIPOR2 (Adiponectin Receptor 2) ELISA Kit
人肾上腺髓质素(ADM)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human ADM (Adrenomedullin) ELISA Kit
人肾上腺素能α1A受体(ADRA1A)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human ADRA1A (Adrenergic Receptor alpha-1A ) ELISA Kit
人脂肪分化相关蛋白(ADRP)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human ADRP (Adipose Differentiation Related Protein) ELISA Kit
人白介素20(IL-20)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-20 (Interleukin 20) ELISA Kit