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神经突出相关蛋白Slitrk1抗体实验原理

 

神经突出相关蛋白Slitrk1抗体实验原理 :
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。 
(2)活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。 
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。 
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。
抗体的生物素化标记实验要点:
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件;
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活;
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等;
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性;
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合;
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用;

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

ALDH16A1 乙醛脱氢酶16家庭A1抗体
AMIGO3 粘附分子IgG样结构域蛋白3抗体
AKR1A1 乙醇脱氢酶1抗体
ALAD δ氨基乙酰丙酸脱水酶抗体
ALS2CR4 肌萎缩侧索硬化症相关蛋白4抗体
alpha 2 Macroglobulin α2巨球蛋白(α-2M)抗体
ACCSL ACCSL蛋白抗体
AFP 甲胎蛋白抗体
Mint3 β淀粉样前体蛋白结合蛋白3抗体
ASTN2 星形肌动蛋白抗体
TREX1 系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体
phospho-ATRIP (Ser68+Ser72) 磷酸化系统性红斑狼疮先关蛋白TREX1抗体
Phospho-ATRIP (Ser224) 磷酸化系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体
AP2M1 接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体
Phospho-AP2M1 (Thr156) 磷酸化接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体
Annexin A7 膜粘连蛋白7抗体
C3orf15 3号染色体开放阅读框15抗体
APOB48R 载脂蛋白B受体抗体
ABCA2 三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2抗体
ApoB  载脂蛋白B抗体
ALOX15B 花生四烯酸15脂氧合酶2抗体
APOC4 载脂蛋白C4抗体
ARH 低密度脂蛋白受体衔接蛋白抗体
AUP1 原始广泛存在蛋白1抗体
ANKRD37 锚蛋白重复结构域蛋白37抗体
A4GALT α1,4-半乳糖基转移酶1
AGTRAP 血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白抗体
AX2R 膜粘连蛋白2受体抗体
ACEI 血管紧张素1转换酶抑制剂抗体