1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在di一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟。
酵母葡萄糖氯霉素琼脂 规格: 250g 作用： 用于牛奶和乳制品中霉菌及酵母菌总数测定
麦芽浸膏汤 规格: 250g 作用： 用于酵母和霉菌的培养，还用于酸性罐头食品商业无菌检验(GB/T4789.26-2003)。
麦芽汁培养基 规格: 250g 作用： 用于酵母菌的增菌培养
麦芽汁琼脂培养基 规格: 250g 作用： 供酵母菌的培养、鉴定及保存菌种用。
1%聚山梨酯80-玉米琼脂培养基 规格: 100g 作用： 用于白色念珠菌芽管试验的培养
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD) 规格: 250g 作用： 用于酵母菌的培养，及供药品和生物制品中含王浆和蜂蜜的合剂酵母菌数测定用。
沙氏葡萄糖琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于白色念珠菌的培养。
沙氏葡萄糖肉汤培养基 规格: 250g 作用： 沙氏葡萄糖液体培养基用于白色念珠菌的培养。
沙氏液体培养基 规格: 250g 作用： 用于真菌的增菌培养，还用于一次性使用卫生用品真菌定性检测
沙氏琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于真菌的分离培养，还用于一次性使用卫生用品真菌菌落总数检测
霉菌液体培养基 规格: 250g 作用： 用于霉菌、酵母的增菌和培养
马铃薯琼脂 规格: 100g 作用： 用于霉菌的培养
马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA) 规格: 250g 作用： 供霉菌和酵母菌计数及分离培养
改良马丁琼脂培养基(真菌营养琼脂培养基) 规格: 250g 作用： 用于真菌培养及药品和生物制品无菌检查用
改良马丁培养基 (真菌培养基) 规格: 250g 作用： 用于真菌培养及药品和生物制品无菌检查用。
高盐察氏培养基 规格: 250g 作用： 用于饲料中霉菌的检验
察氏培养基 规格: 250g 作用： 用于培养能以硝酸盐作为唯一氮源的真菌和细菌，及青霉和曲霉等霉菌的分离培养和形态鉴别
玫瑰红钠琼脂培养基 规格: 250g 作用： 供药品和生物制品中霉菌和酵母菌的计数、分离和培养用。
