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鹿红细胞膜蛋白ELISA试剂盒操作步骤

 

鹿红细胞膜蛋白ELISA试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

 VWF 猪血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子 规格: 48T/96T
 ANG-R-Tie2 猪血管生成素受体Tie2 规格: 48T/96T
 ANG-2 猪血管生成素2 规格: 48T/96T
 ANG-1 猪血管生成素1 规格: 48T/96T
 VCAM-1/CD106 猪血管内皮细胞粘附分子1 规格: 48T/96T
 VE-cad 猪血管内皮钙粘着蛋白复合体 规格: 48T/96T
 ANG-Ⅱ 猪血管紧张素Ⅱ 规格: 48T/96T
 cTn-Ⅰ 猪心肌肌钙蛋白Ⅰ 规格: 48T/96T
 PAI-1 猪纤溶酶原激活物抑制因子1 规格: 48T/96T
 PAI 猪纤溶酶原激活物抑制因子 规格: 48T/96T
 ICAM-3/CD50 猪细胞间粘附分子3 规格: 48T/96T
 ICAM-2/CD102 猪细胞间粘附分子2 规格: 48T/96T
 HA 猪透明质酸 规格: 48T/96T
 MBP 猪髓磷脂碱性蛋白 规格: 48T/96T
 MPO 猪髓过氧化物酶 规格: 48T/96T
 OXR 猪食欲素受体 规格: 48T/96T
 OX-B 猪食欲素/阿立新B 规格: 48T/96T
 SS 猪生长抑素 规格: 48T/96T
 GHRP-Ghrelin 猪生长激素释放肽ghrelin 规格: 48T/96T
 GHRP 猪生长激素释放多肽 规格: 48T/96T
 GH 猪生长激素 规格: 48T/96T