山羊GnRH elisa检测试剂盒夹心法

山羊GnRH elisa检测试剂盒夹心法：
（一）双抗体夹心法
将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体；加入待测样本，孵育使样本中的抗原与固相抗体充分反应，形成固相抗体-抗原复合物，之后洗涤除去其他未结合物；加入标记特异性抗体并孵育，使标记抗体与固相抗体-抗原复合物结合，形成固相抗体-抗原-标记抗体复合物（双抗体夹心），洗涤除去未结合的标记抗体；*根据不同的方法学，加入不同的反应物质（如酶促底物、碱性溶液、氧化剂等），得到反应信号；读取信号，根据预先设定的COV或标准曲线，进行定性或定量的结果判读。
双抗体夹心法易受干扰。常见的干扰物质包括人抗动物抗体（HA）和类因子（RF），可造成假阴性及假阳性结果。在诊断检测过程中，HA可结合多种类型的无关抗原，从而干扰抗原-抗体的特异性结合反应，如一个干扰抗体分子分别与固相抗体及标记抗体结合，尽管样本中没有待测抗原的存在，标记抗体通过干扰抗体连接到固相抗体，在洗涤过程中不会被洗去，因此产生了相应的信号，造成假阳性结果；或干扰抗体分别与固相抗体及标记抗体结合，占据固相抗体与标记抗体上的特异性结合位点，造成无法产生相应的信号，造成假阴性结果。
（二）双抗原夹心法
原理与双抗体夹心法类似，特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗原；加入待测样本，孵育使样本中的抗原与固相抗体充分反应，形成固相抗原-抗体复合物，洗涤除去未结合物质；加入标记特异性抗原并孵育，是标记抗原与固相抗原-抗体复合物结合，形成固相抗原-抗体-标记抗原复合物（双抗原夹心），洗涤除去未结合的标记抗原，加入反应物质，判读结果。