FAS试剂盒检测结果异常如何排查
发表时间:2025-12-24
FAS试剂盒检测结果异常可能由方法、环境等因素导致,以下是具体排查方法:
方法方面
问题原因
检测方法不满足检测目的,或全流程中各环节方法不匹配会导致结果异常。例如:检测方法遗漏必要标志物、提取方法与后续建库方法不匹配、不同方法建库产品上机测序时index重合或碱基多样性不足等。
问题定位
分析检测方法的原理、试剂成分和检测范围是否与目标一致;若某些环节间未做过匹配验证,也可能是问题所在。
问题解决
检测前充分理解各方法的原理、特点和局限性,选择合适方法。
更换全流程中某一环节方法后,需重新进行匹配验证,无问题后方可正式使用。
不同方法结果对比不一致时,不一定是检测问题,可能是方法局限性导致,可考虑采用第三种检测方法进行对比。
环境方面
问题原因
实验环境的温度、湿度、污染度等控制不佳会直接影响实验结果。如温度湿度影响仪器设备工作状态,阳性污染导致假阳性,酶残留剪切核酸分子导致假阴性或结果异常。
问题定位
更换新实验环境看结果是否恢复正常;若无条件更换,可对实验室彻底清洁后实验,观察结果是否恢复。
问题解决
严格遵守实验室环境使用规定,保证样本、试剂、耗材、仪器、实验服等专物专用,避免混淆。
样品制备方面
问题原因
样品制备不当,如脂肪含量较高的动物组织未去除上层脂肪,或未按要求进行均质、离心等操作,可能影响检测结果。
问题解决
严格按照试剂盒说明书进行样品制备,如动物组织需在冰上均质、离心后去除上层脂肪取上清液;植物组织和细胞或细菌需在冰浴中超声波处理;血清、血浆等液体样品可直接检测。