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如何分辨所购试剂盒是否能测血清及血浆样本呢?

 

     对于ELISA客户来说,在实验中可能用到不同的样本,如何辨别所购的试剂盒能否测手中的样本呢?

     对于zui常见的细胞上清,我们大家知道,培养细胞过程中,无特别情况一般是10%的牛血清加入培养基中,经过培养后,细胞的吸收消耗,zui后细胞上清中蛋白含量会很少,而且对于一般牛血清生产的厂家来说,在生产过程中已经去除了大部分对检测有干扰的物质,所以对一般ELISA而言,不会影响抗体抗原的结合。

这要分几种情况:

1、如厂家没有提供专门用于血清血浆样本的缓冲液,只是有一个笼统的或统一的稀释液,那么只要用已知浓度的待测指标蛋白加入所测种属的血清直接加样和用已知浓度的待测指标蛋白加入厂家提供的统一的缓冲液中同时检测,也可得出该试剂盒是否可直接用来检测血清血浆样本。

2、如厂家没有提供专门用于血清血浆样本的缓冲液,那么只要用已知浓度的待测指标蛋白加入所测种属的血清作为样本加样和用已知浓度的待测指标蛋白加入PBS缓冲液中同时检测对比,即可知道该试剂盒是否可以直接用来测血清血浆样本。

3、如厂家提供专门用于血清血浆样本的缓冲液,可用已知浓度的待测指标蛋白加入所测种属的血清直接加样和用缓冲液按说明书分别加样,也可得出结果。如该种类型试剂盒样本总量如为100μl的话,一般而言,会是50μl的样本加样量和50μl的特定的缓冲液。

在使用试剂盒的过程,可将已知浓度的蛋白用血清或血浆调配到试剂盒标定的检测限的zui高值的2倍,加入50μl做两孔,一孔补入常规的50μl标准品稀释液,一孔补入50μl样本分析缓冲液,即可区分出效果来,有时候,有些厂家为了达到“消除”的效果,在样本分析缓冲液中加入待测目标蛋白,为了鉴别出这种情况,也可直接加入样本分析缓冲液做一孔,同时做对比,这样可试出试剂盒中的针对血清血浆样本的缓冲液是否真的有效。


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