1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
6、结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
缓冲动力-硝酸盐培养基
动力—硝酸盐培养基(A法)
明胶培养基(营养明胶)
克氏双糖铁琼脂
缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基)
Koser氏枸椽酸盐肉汤
西蒙氏柠檬酸盐培养基
蛋白胨水 (靛基质培养基)
糖发酵培养基基础
氨基酸脱羧酶试验基础培养基
三糖铁琼脂培养基(TSI)药典
三糖铁琼脂(TSI)
葡萄糖铵培养基
尿素琼脂培养基基础
缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培养基、磷酸盐葡萄糖胨水培养基)
Koser氏枸橼酸盐肉汤
西蒙氏柠檬酸盐培养基
蛋白胨水(靛基质培养基)
糖发酵培养基基础
氨基酸脱羧酶试验基础培养基
